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大肠癌抗原cDNA噬菌体表达库的构建及鉴定
引用本文:刘宇虎,张振书,钟东,武金宝,王亚东,赖卓胜,肖冰,周殿元. 大肠癌抗原cDNA噬菌体表达库的构建及鉴定[J]. 医学争鸣, 2003, 24(18): 1636-1639
作者姓名:刘宇虎  张振书  钟东  武金宝  王亚东  赖卓胜  肖冰  周殿元
作者单位:第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,510515
基金项目:国家自然科学基金 (30 1 71 0 53)
摘    要:目的 :构建人源性大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库 .方法 :从人大肠癌组织中提取总RNA ,纯化mRNA ,用RT PCR反转录合成cDNA第一链 ,用LD PCR合成cDNA第二链 ,除去小于 5 0 0bp的小片段 ,与去磷酸化的λTriplEx2噬菌体连接 ,体外包装 .转染E .coliXL1 Blue大肠杆菌 ,滴定文库的滴度 ,确定文库容量大小 ,用ITPG和X gal测定重组率 .用SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小 .结果 :构建成含 2 .39× 10 6重组子的人大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库 ,重组率为 97.5 % ,插入外源cDNA片段大小范围从 1~ 4kb ,平均长约 2 .4kb .结论 :成功构建人大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库 ,适合于大批量筛选cDNA克隆的大肠癌相关抗原基因

关 键 词:结肠直肠肿瘤 噬菌体 cDNA 文库
文章编号:1000-2790(2003)18-1636-04
修稿时间:2003-02-02

Construction and identification of colorectal carcinoma cDNA phage expression library
LIU Yu Hu,ZHANG Zeng Shu,ZHONG Dong,WU Jin Bao,WANG Ya Dong,LAI Zhuo Sheng,XIAO Bing,ZHOU Dian Yan Institute for Digestive Diseases of Chinese PLA,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou ,China. Construction and identification of colorectal carcinoma cDNA phage expression library[J]. Negative, 2003, 24(18): 1636-1639
Authors:LIU Yu Hu  ZHANG Zeng Shu  ZHONG Dong  WU Jin Bao  WANG Ya Dong  LAI Zhuo Sheng  XIAO Bing  ZHOU Dian Yan Institute for Digestive Diseases of Chinese PLA  Nanfang Hospital  First Military Medical University  Guangzhou   China
Affiliation:LIU Yu Hu,ZHANG Zeng Shu,ZHONG Dong,WU Jin Bao,WANG Ya Dong,LAI Zhuo Sheng,XIAO Bing,ZHOU Dian Yan Institute for Digestive Diseases of Chinese PLA,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:colorectal neoplasms  bacteriophages  cDNA  library
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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