广州地区艰难梭菌耐药检测与耐药机制分析

目的：了解广州地区腹泻患者中分离的艰难梭菌（ CD）耐药情况及耐药发生的可能机制。方法收集广州3 家医院的腹泻患者粪便标本467 份。PCR 方法直接检测粪便中CD 种特异性tpi 基因，对tpi 基因阳性的粪便标本富集芽孢后，采用厌氧培养法用CCFA 培养基进行CD 的分离培养，然后PCR 鉴定可疑菌株的CD 种特异性tpi 基因；采用Etest 法测定CD 对常用抗菌药物的MIC 值并判定菌株对这些药物的敏感性；对耐药菌株，通过PCR 和基因测序方法检测相关的耐药基因如克林霉素耐药相关基因ermB 及喹诺酮类耐药主要相关DNA 旋转酶基因gyrA 和gyrB 的突变情况。结果 467 份粪便标本共检测出tpi 阳性标本29 份，从中共培养出22 株CD。药敏结果显示，所有菌株对甲硝唑、万古霉素、阿莫西林／克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦均敏感，未检测到对上述5 种抗菌药物耐药和中介的菌株。测试菌对克林霉素、青霉素、莫西沙星的耐药率分别是90畅9％（20／22）、27畅3％（6／22）和13畅6％（3／22）。所有耐药菌株中，有2 株同时对克林霉素、莫西沙星、青霉素耐药。20 株对克林霉素耐药的CD 中，有40％（8／20）的菌株ermB 基因阳性，3 株莫西沙星耐药菌株中均检出gyrA、gyrB 基因发生突变。结论 广州地区CD 对临床常用抗菌药物耐药率不高，但对克林霉素有较高的耐药率，ermB 基因的存在是CD 对克林霉素耐药的原因之一，而gyrA、gyrB 基因的突变与CD 对喹诺酮类耐药有关。另外，已出现同时耐3种抗菌药物的多重耐药CD 菌株。

The detection and analysis on drug resistance and drug-resistant mechanisms of Clostridium difficile in Guang-zhou