大规模浓缩提纯微载体培养的病毒悬液制备灭活病毒疫苗

本实验室采用DEAE-SephadexA50珠为微载体,大规模培养原代细胞以生产灭活脊髓灰质炎和狂犬病毒疫苗。由于DEAE-SephadexA50具有阴离子交换的能力,故接种病毒前不能用无血清培养液或缓冲液洗涤去除细胞培养中的残余牛血清蛋白。用该细胞培养收获的病毒悬液如用于制备人用疫苗,将含有过高水平的血清蛋白,多次接种会引起过敏反应。本文报道能去除病毒悬液中残余血清蛋白的浓缩提纯方法。病毒悬液中残余牛血清蛋白含量用Exa-Phore稀释标准血清和样品的对流免疫电泳测定,可测出1∶10~6稀释血清中的白蛋白和1∶1.28×10~5稀释血清中的免疫球蛋白,分别相当于0.03μg/ml浓度的白蛋白和0.23μg/ml浓度的免疫球蛋白。病毒悬液浓缩和提纯前先经Pall滤器澄清过滤。