| 禽流感病毒血凝素H5特异性单克隆抗体的制备及ELISA捕获法的建立 |
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| 引用本文： | 廖志勇,王压娣,温坤,丘立文,狄飚,袁国勇,车小燕.禽流感病毒血凝素H5特异性单克隆抗体的制备及ELISA捕获法的建立[J].免疫学杂志,2007,23(3):339-343. |
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| 作者姓名： | 廖志勇 王压娣 温坤 丘立文 狄飚 袁国勇 车小燕 |
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| 作者单位： | 南方医科大学珠江医院临床医学基础研究所,广州,510280;广州市疾病预防控制中心,广州,510080;香港大学微生物系,香港 |
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| 基金项目： | 广东省广州市科技攻关项目
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广东省科技攻关计划 |
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| 摘 要： | 目的 制备和鉴定禽流感病毒(H5N1)血凝素(H5)特异性单克隆抗体(mAb),建立H5抗原的双抗体夹心ELISA捕获法.方法 以H5血凝素和携带H5全长基因的质粒免疫Balb/c小鼠制备mAb,利用血凝抑制(HI)实验筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗体识别表位,并采用抗体配对试验筛选捕获抗体和检测抗体,建立测定H5抗原的双抗体夹心ELISA捕获法.结果 获得16株特异性针对H5的单克隆抗体,与A型流感病毒H1、H3、H7、H9和B型流感病毒的血凝素无HI交叉反应,对H5血凝素的血凝抑制效价为1:100～1:51 200;通过配对实验,建立以单克隆抗体H5M9为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记单克隆抗体H5M11为检测抗体的双抗体夹心ELISA;检测多株H5N1病毒和H5血凝素的最低检出值为1/32血凝单位,检测A型流感病毒H1N1、H3N2、B型流感病毒以及H7、H9血凝素均为阴性.结论 建立了一种灵敏度高、特异性强的测定H5抗原的ELISA捕获法,可应用于禽流感病毒H5N1感染的实验室早期诊断.
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| 关 键 词： | 禽流感病毒H5N1 H5血凝素 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）03-0339-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-14 |
| 修稿时间： | 2007-02-11 |
Production of monoclonal antibodies specific to H5 hemagglutinin of avian influenza virus and establishment of the H5 antigen capture ELISA |
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| LIAO Zhi-yong,WANG Ya-di,WEN Kun,QIU Li-wen,DI Biao,YUEN Kwok-yung,CHE Xiao-yan.Production of monoclonal antibodies specific to H5 hemagglutinin of avian influenza virus and establishment of the H5 antigen capture ELISA[J].Immunological Journal,2007,23(3):339-343. |
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| Authors: | LIAO Zhi-yong WANG Ya-di WEN Kun QIU Li-wen DI Biao YUEN Kwok-yung CHE Xiao-yan |
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| Institution: | Institute of Basic Clinical Medicine, Zhujiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510280, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Avian influenza virus H5N1 H5 hemagglutinin Monoclonal antibody Enzyme-linked immunesorbent assay |
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