HCV非结构蛋白3真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3的构建 |
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引用本文: | 李君武,江静,王志鹏,许小亮,林绍强,黄泽棋,韦静,李小兰. HCV非结构蛋白3真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3的构建[J]. 中国病理生理杂志, 2004, 20(11): 2155-2157 |
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作者姓名: | 李君武 江静 王志鹏 许小亮 林绍强 黄泽棋 韦静 李小兰 |
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作者单位: | 暨南大学医学院微生物免疫教研室,广东 广州 510632 |
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基金项目: | 教育部归国留学人员科研基金资助项目 (教外司 [2 0 0 0 ]4 79),广东省自然科学基金资助项目 (粤科基办[2 0 0 1]10 - 0 10 371) |
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摘 要: | 目的:构建HCV NS3基因真核表达载体,为进一步研究和解析HCV NS3基因诱发不死化人肝细胞癌化的机制准备了条件。方法:将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1-3011质粒转化感受态菌JM109并扩增;提取pBRTM/HCV1-3011质粒;从pBRTM/HCV1-3011质粒中PCR扩增出HCV NS3片段;并将其插入到克隆载体pMD18-T中,再与表达载体pcDNA3.1(-)重组,以得到重组的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3;最后限制性酶切鉴定HCV NS3表达载体。结果:从pBRTM/HCV1-3011质粒中扩增出的HCV NS3片段大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;凝胶电泳结果证明已将此片段克隆到pcDNA3.1/NS3内。结论:成功地构建了HCV NS3基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/NS3。
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关 键 词: | 肝炎病毒 丙型 基因 载体 |
文章编号: | 1000-4718(2004)11-2155-04 |
收稿时间: | 2004-07-09 |
修稿时间: | 2004-09-27 |
Construction of eukaryotic expression vector pcDNA3.1(-)/NS3 containing HCV NS3 gene |
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Abstract: | |
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Keywords: | Hepatitis Cvirus Genes Vectors |
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