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干预NRG-1/ErbB通路对大鼠脂肪干细胞向类窦房结细胞分化的影响
引用本文:李勇,李宾公,肖坚,李哲,张健.干预NRG-1/ErbB通路对大鼠脂肪干细胞向类窦房结细胞分化的影响[J].中国药理学通报,2013,29(7):937-942.
作者姓名:李勇  李宾公  肖坚  李哲  张健
作者单位:南昌大学第一附属医院心内科,江西省高血压病研究所,江西,南昌,330006
基金项目:国家自然科学基金资助项目(项目编号:81041097)江西省自然科学基金资助项目(项目编号:2008GZY0045)
摘    要:目的探讨在大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向心肌样细胞分化的一定时期内,通过干预NRG-1/ErbB通路是否可调控其向类窦房结样细胞或工作肌样细胞分化。方法分离培养大鼠ADSCs,免疫荧光测定细胞相关表面抗原鉴定其干细胞特性。取3代ADSCs加入含10μmol.L-15-氮胞苷(5-Aza)和10μg.L-1bFGF的培养基处理24 h后分3组向心肌样细胞诱导分化,包括对照组、AG1478组、神经调节蛋白-1(NRG-1)组,取正常培养的为ADSCs组。诱导3周后,通过RT-PCR检测各组NKx2.5、HCN4、TBX3、TBX2基因,Westernblot检测TBX3蛋白,膜片钳检测各组动作电位的表达差异。结果 ADSCs加5-Aza诱导3周后表达心脏早期转录因子Nkx2.5及肌钙蛋白,证明5-Aza可以将ADSCs诱导成心肌样细胞。而AG1478组起搏相关基因(HCN4、TBX3、TBX2)的表达明显强于对照组及NRG-1组(P<0.05),TBX3蛋白也强于对照组(P<0.05),并能产生窦房结样动作电位。而NRG-1组Nkx2.5的表达高于对照组及AG1478组(P<0.05),亦能检测到心室肌样动作电位。结论在大鼠AD-SCs向心肌样细胞分化的一定时间内通过干预NRG-1/ErbB通路可使其定向分化为起搏样细胞或工作肌样细胞,这为今后干细胞生物起搏研究做了有益探讨。

关 键 词:脂肪干细胞  神经调节蛋白-1  类窦房结样细胞  TBX3  生物起搏  5-氮胞苷

Role of intervening NRG-ErbB signaling pathway in differentiation of mouse dipose tissue-derived adult stem cells into sinus node like cells
LI Yong , LI Bin-gong , XIAO Jian , LI Zhe , ZHANG Jian.Role of intervening NRG-ErbB signaling pathway in differentiation of mouse dipose tissue-derived adult stem cells into sinus node like cells[J].Chinese Pharmacological Bulletin,2013,29(7):937-942.
Authors:LI Yong  LI Bin-gong  XIAO Jian  LI Zhe  ZHANG Jian
Abstract:
Keywords:adipose tissue-derived adult stem cells  NRG-1  sinus node-like cells  TBX3  biological pacemaker  5-Azacytidine
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