| 红系分化相关基因相互作用蛋白质的分离与鉴定 |
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| 引用本文： | 徐诚望,王治东,李长燕,许望翔,詹轶群,于淼,杨晓明.红系分化相关基因相互作用蛋白质的分离与鉴定[J].医学分子生物学杂志,2008,5(4). |
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| 作者姓名： | 徐诚望 王治东 李长燕 许望翔 詹轶群 于淼 杨晓明 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京市,100850 |
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| 摘 要： | 目的制备红系分化相关基因(erythroid differentiation-associated gene,EDAG)蛋白的单克隆抗体,利用免疫沉淀联合质谱技术对EDAG相互作用蛋白质进行分离与鉴定。方法构建EDAG原核表达载体,通过诱导、表达、纯化获得EDAG融合蛋白,杂交瘤技术建立分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用Western印迹筛选阳性杂交瘤细胞,免疫小鼠得腹水,最后用免疫共沉淀与质谱联合鉴定EDAG相互作用蛋白。结果纯化获得EDAG重组蛋白,筛选出4株分泌EDAG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备了腹水。该抗体均可用于内源EDAG蛋白的检测,其中两种抗体可用于免疫共沉淀实验,运用质谱技术筛选获得EDAG候选相互作用蛋白。结论利用EDAG单克隆抗体,筛选到EDAG候选相互作用蛋白质13种,涉及细胞增殖及转录等过程,为EDAG的功能研究及其分子机制的阐明提供了新的线索。
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| 关 键 词： | 单克隆抗体 免疫共沉淀 质谱 相互作用蛋白质 |
Isolation and Identification of EDAG Interacting Proteins |
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| XU Chengwang,WANG Zhidong,LI Changyan,XU Wangxiang,ZHAN Yiqun,YU Miao,YANG Xiaoming.Isolation and Identification of EDAG Interacting Proteins[J].Journal of Medical Molecular Biology,2008,5(4). |
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| Authors: | XU Chengwang WANG Zhidong LI Changyan XU Wangxiang ZHAN Yiqun YU Miao YANG Xiaoming |
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| Institution: | XU Chengwang,WANG Zhidong,LI Changyan,XU Wangxiang,ZHAN Yiqun,YU Miao,YANG Xiaoming Beijing Institute of Radiation Medicine,Beijing,100850,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | monoclonal antibody co-immunoprecipitation mass spectrum interacting protein |
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