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| 孕烷X受体应答元件萤光素酶报告基因的构建及活性检测 | |
| 引用本文： | 冯帆,张帆,司文,高旭东,王春平,杨予涛,杨俊兰,杨永平,史国兵.孕烷X受体应答元件萤光素酶报告基因的构建及活性检测[J].军医进修学院学报,2015,36(2):166-170. |
| 作者姓名： | 冯帆 张帆 司文 高旭东 王春平 杨予涛 杨俊兰 杨永平 史国兵 |
| 作者单位： | 1. 沈阳军区总医院药剂科,辽宁沈阳,110016 2. 解放军总医院肿瘤内科,北京,100853 3. 解放军总医院肿瘤内科,北京100853;南开大学医学院,天津300192 4. 解放军第302医院肝脏肿瘤诊疗与研究中心,北京,100039 5. 首都医科大学神经科学研究所,北京,100071 |
| 基金项目： | 国家科技重大专项项目，国家自然科学基金项目(81272330 |
| 摘 要： | 目的建立孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)应答元件萤光素酶报告基因,并检测其活性。方法利用化学合成方法得到五聚体PXR应答元件(everted repeat elelment-6,ER-6元件)5和(direct repeat element-3,DR-3)5序列;将五聚体PXR应答元件序列(ER6或DR3)克隆至p GL3-Promoter载体上;利用萤光素酶报告基因系统检测PXR应答元件报告基因的活性。结果 PXR应答元件萤光素酶报告基因具有明确的活性。PXR激动剂茴香霉素能够剂量依赖地诱导ER6-Luc(R2=0.95;P=0.002 2)和DR3-Luc(R2=0.96;P=0.000 91)报告基因的活性,其EC50值分别为(0.11±0.04)μmol/L和(0.13±0.06)μmol/L;PXR拮抗剂酮康唑能够剂量依赖地降低茴香霉素诱导的ER6-Luc(R2=0.97;P=0.000 85)和DR3-Luc(R2=0.98;P=0.000 11)的活性,IC50值分别为(0.71±0.11)μmol/L和(1.73±0.15)μmol/L。结论成功构建了PXR应答元件报告基因,建立了PXR转录活性的检测方法。 |
| 关 键 词： | 孕烷X受体 孕烷X受体应答元件 萤光素酶报告基因 转录活性 |
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