| 人杀菌通透性增强蛋白功能性N端片段在酵母细胞表面的展示和鉴定 |
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| 引用本文： | 李晶琴,李慎涛,温铭杰,吕喆,孙宝清,许子华,孔庆利,安云庆.人杀菌通透性增强蛋白功能性N端片段在酵母细胞表面的展示和鉴定[J].中国免疫学杂志,2007,23(8):738-742. |
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| 作者姓名： | 李晶琴 李慎涛 温铭杰 吕喆 孙宝清 许子华 孔庆利 安云庆 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学免疫学系,北京,100069
2. 首都医科大学燕京医学院,北京,100069 |
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| 摘 要： | 目的：建立BPI23酵母细胞表面展示方法,使之表达具有生物活性的BPI23蛋白。方法：构建pYD1-BPI600重组质粒,转化酵母细胞,经半乳糖诱导使BPI23在酵母细胞表面表达;采用间接免疫荧光法,用荧光显微镜和流式细胞仪检测BPI23在酵母细胞表面的展示情况;采用鲎基质显色法,检测BPI23中和内毒素的生物学活性。结果：酶切和DNA测序鉴定证实,pYD1-BPI600重组质粒含有人BPI600基因片段。荧光显微镜和流式细胞仪检测结果显示,BPI23在pYD1-BPI600重组质粒转化的酵母细胞表面得到展示;在诱导后第24小时展示BPI23的酵母细胞数占总细胞数的39%。酵母细胞表面展示的BPI23具有中和内毒素的活性。结论：成功构建了pYD1-BPI600酵母表达载体,转化后在酵母细胞表面展示了功能性目的蛋白,为BPI23突变体库的建立和功能优化BPI23突变体的筛选奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人杀菌通透性增强蛋白 酵母表面展示 内毒素 |
| 文章编号： | 1000-484X（2007）08-0738-05 |
| 修稿时间： | 2007-01-222007-04-29 |
Identification of N-terminal fragment of human bactericidal/permeability increasing protein displayed on the surface of yeast cells |
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| LI Jing-Qin,LI Shen-Tao,WEN Ming-Jie,L Zhe,SUN Bao-Qing,XU Zi-Hua,KONG Qing-Li,AN Yun-Qing.Identification of N-terminal fragment of human bactericidal/permeability increasing protein displayed on the surface of yeast cells[J].Chinese Journal of Immunology,2007,23(8):738-742. |
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| Authors: | LI Jing-Qin LI Shen-Tao WEN Ming-Jie L Zhe SUN Bao-Qing XU Zi-Hua KONG Qing-Li AN Yun-Qing |
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| Institution: | Department of Immunology, Capital Medical University, Beijing 100069, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human bactericidal/permeability increasing protein Yeast surface display Lipopolysaccharide |
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