| 丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 成军,施双双,钟彦伟,夏小兵,王刚,王琳,刘妍,陈菊梅.丙型肝炎病毒核心蛋白可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达[J].解放军医学杂志,2000,25(6):394-397. |
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| 作者姓名： | 成军 施双双 钟彦伟 夏小兵 王刚 王琳 刘妍 陈菊梅 |
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| 作者单位： | 100039,北京,解放军第302医院 |
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| 摘 要： | 利用分子生物学技术，构建表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白的人源单链可变区抗体（ＳｃＦｖ）的原核表达载体，并在大肠杆菌ＪＭ１０９中表达可溶性的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ。以重组的ＨＣＶ核心蛋白为包被抗原，利用噬菌体抗体库的表面展示技术，筛选到含有ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒，经ＮｃｏⅠ／Ｎｏｔ Ⅰ酶切鉴定，该ＳｃＦｖ基因由７５０ｂｐ组成。将其亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ表达载体中，转化大肠杆菌ＪＭ１０９，提取质粒进行ＤＮＡ序列测定，符合ＳｃＦｖ的重链可变区和轻链可变区基因结构特点。ＩＰＴＧ诱导转化的大肠杆菌ＪＭ１０９，在其培养上清中获得了可溶性ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ的表达。酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）证实表达的ＨＣＶ－ｃｏｒｅ－ＳｃＦｖ进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡ
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| 关 键 词： | 丙型肝炎 核心蛋白 单链可变区抗体 HCV 大肠杆菌 |
EXPRESSION OF SOLUBLE HUMAN ScFv AGAINST CORE PROTEIN OF HEPATITIS C VIRUS IN E COLI |
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