蜡样芽胞杆菌聚合酶链式反应实验室检测技术进展

蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus,B.cereus)是一种革兰阳性需氧芽孢杆菌,广泛分布于植物和土壤等环境中,它是一种食源性致病菌,通常引起食物中毒的B.cereus为呕吐型和腹泻型两类,常在世界范围内引起食物中毒1-3].检测B.cereus的传统方法是培养法,但其敏感性低且耗时长.聚合酶链式反应(PCR),是一种DNA扩增技术,当存在模板DNA、底物、上下游引物和耐热DNA聚合酶时,经过多次"变性-复性-延伸反应"的循环过程,模板DNA就可得到大量扩增.2004年,B.cereus的全基因组测序已经完成,并在其36个基因序列中确定了bcr1～18等18个不同的DNA重复片段;根据B.cereus不同性质的重复片段可分为3组4]:A组是bcr1～3,每株具有从4～116高度可变的拷贝数,是染色体之间的非保守区域,该区域的基因编码与炭疽芽胞杆菌及苏云金芽胞杆菌具有高度的同源性;B组在bcr4～6区域,其保守性介于A组和C组之间;C组分布在bcr7～18,为高度保守基因区域.根据B.cereus特异性基因片段中的开放阅读框架部份序列设计引物,可进行PCR检测.现将B.cereus的PCR检测技术进展作如下综述.