| 家兔pEGFP-N1/rCNP质粒的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 张剑,肖乐,龚昆梅,王昆华,张小文,欧阳一鸣,凌平,朱宇,刘为军.家兔pEGFP-N1/rCNP质粒的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达[J].现代预防医学,2011,38(22):4684-4686. |
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| 作者姓名： | 张剑 肖乐 龚昆梅 王昆华 张小文 欧阳一鸣 凌平 朱宇 刘为军 |
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| 作者单位： | 1. 昆明医学院附属昆华医院,云南省第一人民医院普外科,昆明,650034
2. 昆明医学院第二附属医院普外科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30860276); 云南省科技厅科研基金资助项目(2007C248M); 云南省科技厅-昆明医学院应用基础联合专项基金(2008CD042) |
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| 摘 要： | 目的]构建真核表达载体pEGFP-N1/rCNP并转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,观察CNP基因在其中的表达。方法]利用RT-PCR方法从家兔腹主动脉组织扩增获得CNP基因全场全长编码区,克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,构建重组载体pEGFP-N1/rCNP。利用LipofectaminTM 2000脂质体将重组质粒转染人脐静脉内皮细胞。结果]重组质粒pEGFP-N1/rCNP构建成功;将其转染人脐静脉内皮细胞,观察到目的基因CNP表达。结论]成功构建了家兔腹主动脉CNP基因的真核表达载体pEGFP-N1/rCNP,并可转染人脐静脉内皮细胞。
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| 关 键 词： | C型利钠肽 载体构建 转染 内皮细胞 |
CONSTRUCTION OF RABBIT CNP GENE EUKARYOT IC EXPRESSION VECTOR AND ITS EXPRESSION IN HUMAN UMBILICAL VEIN ENDOTHELIAL CELLS |
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| ZHANG Jian,XIAO Le,GONG Kun-mei,et al..CONSTRUCTION OF RABBIT CNP GENE EUKARYOT IC EXPRESSION VECTOR AND ITS EXPRESSION IN HUMAN UMBILICAL VEIN ENDOTHELIAL CELLS[J].Modern Preventive Medicine,2011,38(22):4684-4686. |
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| Authors: | ZHANG Jian XIAO Le GONG Kun-mei |
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| Institution: | ZHANG Jian,XIAO Le,GONG Kun-mei,et al.(General Surgical Department of the First People's Hospital of Yunnan Province,The Kunhua Affiliated Hospital,Kunming Medical College,Kunming 650032,China) |
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| Abstract: | Objective]To construct rabbit CNP gene eukaryotic expression vector and detect it expression in human umbilical vein endothelial cells in vitro.Methods]Rabbit CNP gene was amplified from the abdominal aorta of rabbit by RT-PCR,was inserted into an eukaryotic expression vector pEGFP-N1 carrying the enhanced green fluorrescent protein,and generated a new plasmid pEGFP-N1/rCNP.The identified recombinate pEGFP-N1/rCNP eukaryotic expression vector was transfected into human umbilical vein endothelial cells wit... |
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| Keywords: | C-type natriuretic peptide Vector construction Transfectione Endothelial cells |
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