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实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的建立和应用
引用本文:王忠发,王建跃,卢亦愚,何伟贤,王学海. 实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的建立和应用[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(9): 1591-1593
作者姓名:王忠发  王建跃  卢亦愚  何伟贤  王学海
作者单位:1. 浙江省舟山市疾病预防控制中心,浙江舟山,316000
2. 浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009
3. 浙江大学医学院病原生物研究所,杭州,310031
摘    要:目的:建立一种快速、定量、特异、灵敏的PCR方法用于对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的早期诊断和疫情监测。方法:根据GenBank登录的IHHNV毒株序列,使用生物学软件进行序列比对,在IHHNV保守区序列设计特异性引物与Taqm an探针。对实时荧光定量PCR反应条件进行优化以缩短检测时间,提高特异性、灵敏度、重复性,并与普通PCR进行盲样测试的比对。结果:本法线性范围5×102~5×107拷贝/ml,检出限5×101拷贝/ml,灵敏度超过普通PCR100倍,特异性高于普通PCR,重复性极好(S=0.035~0.39,CV=0.13%~1.05%),检测时间为普通PCR的1/5,现场盲样IHHNV检出阳性率高于普通PCR 26.00%。结论:本研究建立Taqm an实时荧光定量PCR用于对虾IH-HNV检测具有特异、灵敏、快速、定量、重复性好等优点。

关 键 词:实时荧光定量PCR  病毒载量
文章编号:1004-8685(2007)09-1591-03
收稿时间:2007-03-14
修稿时间:2007-03-14

Development and application of a real -time PCR for IHHNV
Wang Zhong-fa,Wang Jian-yue,Lu Yi-yu,He Wei-xian,Wang Xue-hai. Development and application of a real -time PCR for IHHNV[J]. Chinses Journal of Health Laboratory Technology, 2007, 17(9): 1591-1593
Authors:Wang Zhong-fa  Wang Jian-yue  Lu Yi-yu  He Wei-xian  Wang Xue-hai
Abstract:
Keywords:IHHNV
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