除湿胃苓汤对小鼠特异性皮炎的治疗作用及组织ERK1/2、Claudin 1表达的影响

目的] 探究除湿胃苓汤(Chushi Weiling Decoction，CSWLD)对特异性皮炎(atopic dermatitis，AD)小鼠的皮损改善效果，以及对组织细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2，ERK1/2)、紧密连接蛋白1(Claudin 1)表达的影响。方法]采用二硝基氟苯(dinitro fluoro benzene，DNFB)诱导建立小鼠AD模型，随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液)和低、中、高CSWLD组(5、10、20 mL·kg-1)，另设置空白组(0.9%氯化钠溶液)，各组均以相应药物灌胃1周。给药结束后，评价皮损改善情况，并行炎症评分。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法检测血清白细胞介素-33(interleukin-33，IL-33)、IL-6、IL-4、CC类趋化因子配体-5(C-C motif chemokine ligand-5，CCL-5)和CCL-2含量。取皮损部位组织，以免疫组化染色测定IL-33、肿瘤抑制素2(suppression of tumorigenicity 2，ST2)、Claudin 1含量；以定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction，qPCR)和免疫印迹检测ERK1/2、Claudin 1的mRNA和蛋白表达。结果] 与空白组比较，模型组小鼠皮肤红肿、干燥、结痂明显，炎症评分增加，血清IL-33、IL-6、IL-4、CCL-5、CCL-2含量升高，组织IL-33、ST2含量增加，Claudin 1 mRNA表达降低，ERK1/2 mRNA表达升高，Claudin 1蛋白表达降低，ERK1/2磷酸化产物(phosphorylated-ERK1/2，p-ERK1/2)与ERK1/2蛋白比值增加(均P<0.01)。在给予不同剂量CSWLD后，小鼠皮损部位红肿消退，结痂脱落，症状减轻。与模型组比较，中、高CSWLD组小鼠炎症评分降低，血清IL-33、IL-6、IL-4、CCL-5、CCL-2 含量下降，组织IL-33、ST2 含量降低，Claudin 1 mRNA 表达升高，ERK1/2 mRNA 表达降低，Claudin 1蛋白表达升高，p-ERK1/2与ERK1/2蛋白比值降低(P<0.05，P<0.01)；而低CSWLD组小鼠的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论] CSWLD可下调炎性介质，并能抑制组织ERK1/2表达、促进组织Claudin 1表达，缓解AD小鼠皮损症状。

Impact of Chushi Weiling Decoction on Treatment in Mice with Atopic Dermatitis and Expression of ERK1/2 and Claudin 1 of Tissue