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山茱萸萜类甲羟戊酸合成途径关键酶CoHMGS基因的克隆与分析
引用本文:侯典云,王瑶瑶,刘晓冉,张佳琪,马占强,胥华伟,王笑尘. 山茱萸萜类甲羟戊酸合成途径关键酶CoHMGS基因的克隆与分析[J]. 中草药, 2021, 52(18): 5716-5721
作者姓名:侯典云  王瑶瑶  刘晓冉  张佳琪  马占强  胥华伟  王笑尘
作者单位:河南科技大学农学院, 河南 洛阳 471023;洛阳市道地药材繁育与创新利用工程技术研究中心, 河南 洛阳 471023;南阳市山茱萸研究所, 河南 南阳 474550
基金项目:国家自然科学基金资助项目(U1404829);中央本级重大增减支项目“名贵中药资源可持续利用能力建设项目”(2060302);河南省自然科学基金项目(202300410151);河南省科技攻关项目(202102110156)
摘    要:目的克隆得到山茱萸Cornusofficinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础。方法以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序。利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能。结果克隆得到长度为1645 bp的CoHMGS序列,包含1413 bp的完整开放阅读框,编码470个氨基酸。蛋白整体带负电荷,为不稳定亲水性蛋白,定位于细胞质内,不含跨膜结构。结论首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因,对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测,为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础。

关 键 词:山茱萸  甲羟戊酸途径  CoHMGS  RT-PCR扩增  基因克隆
收稿时间:2021-04-06

Cloning and analysis of a key enzyme of CoHMGS gene involved in mevalonate pathway of terpene biosynthesis in Cornus officinalis
HOU Dian-yun,WANG Yao-yao,LIU Xiao-ran,ZHANG Jia-qi,MA Zhan-qiang,XU Hua-wei,WANG Xiao-chen. Cloning and analysis of a key enzyme of CoHMGS gene involved in mevalonate pathway of terpene biosynthesis in Cornus officinalis[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2021, 52(18): 5716-5721
Authors:HOU Dian-yun  WANG Yao-yao  LIU Xiao-ran  ZHANG Jia-qi  MA Zhan-qiang  XU Hua-wei  WANG Xiao-chen
Affiliation:College of Tree Peony, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, China;The Luoyang Engineering Research Center of Breeding and Utilization of Dao-di Herbs, Luoyang 471023, China; Nan yang Institute of Cornus officinalis, Nanyang 474550, China
Abstract:
Keywords:Cornus officinalis Sieb. et Zucc.  MVA pathway  CoHMGS  RF-PCR amplification  gene cloning
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