Caspase-3抑制剂抑制长春碱诱导的人乳腺癌细胞凋亡及IκΒ-α降解

目的： 本实验通过阻断caspase-3途径，观察长春碱诱导的肿瘤细胞凋亡及胞浆内IκΒ-α蛋白降解的影响，以探索长春碱诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导途径。方法: 用二甲基亚砜对照、100 μmol/L caspase-3抑制剂(DEVD-CHO)预处理乳腺癌Bcap37细胞3 h后，加入不同浓度的长春碱，以MTT法检测肿瘤细胞增殖能力，以细胞DNA片段分析及PI染色法检测肿瘤细胞凋亡，以蛋白免疫印迹法检测pro-caspase-3和IκΒ-α蛋白的变化。结果: 蛋白免疫印迹法证实长春碱可诱导pro-caspase-3蛋白的降解。经MTT法、DNA凋亡梯状条带法及流式细胞仪PI染色法证实，DEVD-CHO能减弱由长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡。两组的IC50分别为56.8 μmol/L和87.4 μmol/L。蛋白免疫印迹实验表明，DEVD-CHO能抑制由长春碱所诱导的IκΒ-α蛋白磷酸化降解。结论: 在长春碱诱导肿瘤细胞凋亡过程中，NF-κΒ/IκΒ信号转导途径起着重要作用，caspase-3途径参与调节。阻断该途径将减弱长春碱所诱导的肿瘤细胞凋亡和IκΒ-α磷酸化降解。