粪菌移植对不同溃疡性结肠炎小鼠的疗效及其中药性味研究

背景 溃疡性结肠炎被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。目前治疗技术均有相应的不足之处，粪菌移植（FMT）治疗溃疡性结肠炎的有效性已被证实，但疗效参差不齐。 目的 比较FMT治疗小鼠普通型溃疡性结肠炎模型（CUCM）与湿热型溃疡性结肠炎模型（DUCM）的效果及FMT（新金汁）的中药性味。 方法 于2019年12月9—28日，将35只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为7组，分别为正常对照组（Control组）、CUCM组、CUCM+FMT组、CUCM+5-氨基水杨酸（5-ASA）组、DUCM组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组，每组各5只小鼠。Control组不做任何干预处理；CUCM组和DUCM组根据造模需求分别制备模型；CUCM+FMT组和DUCM+FMT组于造模成功后，给予制备的粪菌液0.2 ml对小鼠进行灌肠；CUCM+5-ASA组和DUCM+5-ASA组于造模成功后，给予0.019 5 g/ml 5-ASA对小鼠进行灌肠。通过HE染色观察各组肠组织的变化，透射电镜观察组织的超微结构变化，流式细胞检测辅助性T细胞1（Th1）、Th2细胞含量，血常规检测血液中白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）和血红蛋白（HGB），尼莫地平法评估干预前后疗效指数，16S rRNA高通量测序技术检测肠内容物中的菌群分布。 结果 各组小鼠均造模成功。肠组织HE染色显示：CUCM组与DUCM组肠黏膜表面出现不同程度的缺损或脱落坏死；CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组肠黏膜基本完整；并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比，前者腺体较后者排列整齐并紧密。肠组织透射电镜超微结构显示：CUCM组与DUCM组上皮细胞表面微绒毛稀疏，杯状细胞减少；CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组微绒毛较为致密，杯状细胞数目较多；并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比，前者微绒毛较后者紧密，杯状细胞也较后者多。各组小鼠Th1、Th2细胞含量、WBC、RBC、PLT、HGB比较，差异均有统计学意义（P<0.001）。CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组疗效指数高于CUCM+FMT组（P<0.05）。菌群分析显示CUCM组与DUCM组中丰度显著降低的属是Ruminococcus，显著升高的属是Akkermansia，经过FMT治疗后，CUCM+FMT组、DUCM+FMT组有逐步向Control组靠拢的趋势，表明肠道菌群正在改善。 结论 FMT可治疗溃疡性结肠炎模型小鼠，且针对DUCM疗效更佳，FMT（新金汁）的中药性味苦寒，推测其发挥功效的途径可能是通过调节肠道菌群进而改善Th1/Th2细胞平衡，达到治疗的目的。

Medicinal Flavor of Fecal Microbiota and Efficacies of Its Transplantation in Mice with Different Types of Ulcerative Colitis