| 人转化生长因子β1及骨形成蛋白7基因共表达载体的构建及对骨髓基质干细胞的定向诱导作用 |
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| 引用本文： | 龙华,袁华,马保安,鱼兵,范德刚,范清宇. 人转化生长因子β1及骨形成蛋白7基因共表达载体的构建及对骨髓基质干细胞的定向诱导作用[J]. 中国修复重建外科杂志, 2006, 20(12): 1224-1228 |
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| 作者姓名： | 龙华 袁华 马保安 鱼兵 范德刚 范清宇 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学附属唐都医院骨科,西安,710038
2. 第四军医大学附属西京医院康复科 |
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| 摘 要： | 目的 构建人转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)及骨形成蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)基因共表达腺病毒真核表达载体,并观察感染骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)后目的 基因的表达和对细胞生物学行为的影响.方法 以复制缺陷的腺病毒AdEasy为基因载体,制备携带TGF-β1及BMP 7基因的高滴度腺病毒液感染人MSCs,通过免疫细胞化学、原位杂交、RT-PCR及己糖醛酸水平检测等方法鉴定外源基因的表达,分析外源性基因共表达对MSCs定向软骨分化的调控机制. 结果 腺病毒感染72 h后,TGF-β1和BMP 7免疫细胞化学染色可见大部份MSCs胞浆内均出现棕黄色粗颗粒,通过原位杂交检测出Ⅱ型胶原蛋白基因mRNA,感染10 d后细胞培养液中己糖醛酸含量为68.03±3.34μg/ml与感染前的53.20±3.70μg/ml明显升高有统计学意义(P＜0.01).结论 成功构建了人TGF-β1及BMP-7共表达基因腺病毒表达载体,证实其在MSCs中的表达和具有向软骨细胞定向分化的诱导作用,为软骨缺损修复的局部基因治疗奠定实验基础.
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| 关 键 词： | 转化生长因子β1 骨形成蛋白7 骨髓基质干细胞 软骨 基因治疗 |
| 收稿时间： | 2005-08-25 |
| 修稿时间： | 2006-03-22 |
CONSTRUCTION OF RECOMBINANT ADENOVIRUS BEARING HUMAN TRANSFORMING GROWTH FACTOR β1AND BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 7 GENES AND ITS DIRECTIONAL INDUCEMENT EFFECT ON MARROW STROMAL STEM CELLS |
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| LONG Hua,YUAN Hua,MA Baoan,et al.. CONSTRUCTION OF RECOMBINANT ADENOVIRUS BEARING HUMAN TRANSFORMING GROWTH FACTOR β1AND BONE MORPHOGENETIC PROTEIN 7 GENES AND ITS DIRECTIONAL INDUCEMENT EFFECT ON MARROW STROMAL STEM CELLS[J]. Chinese journal of reparative and reconstructive surgery, 2006, 20(12): 1224-1228 |
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| Authors: | LONG Hua YUAN Hua MA Baoan et al. |
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| Affiliation: | Department of Orthopedics, Tangdu Hospital, Fourth Military Medical University, Xi'an Shaanxi, 710038, PR China. |
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