| 摘 要： | 目的:研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对二氧化硅(SiO_2)诱导的肺泡巨噬细胞自噬的激活,是否对自身分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β(TGF-β)产生影响。方法:收集SD雄性大鼠肺泡巨噬细胞灌洗液,将其随机分为对照组,SiO_2刺激组(SiO_2组),自噬抑制剂组(3-MA组)。采用体外暴露肺泡巨噬细胞染尘法,染尘成功后12 h给予10 mmol/L 3-MA干预。分别于干预后6、18、24 h和36 h用胰酶消化并收集体外培养的肺泡巨噬细胞。采用H-E染色观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的定位表达;免疫印迹检测肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白定量。结果:SiO_2组与对照组相比肺泡巨噬细胞体积增大,胞质丰富,部分细胞胞质内可见矽尘吞噬颗粒。3-MA组较SiO_2组肺泡巨噬细胞形态改变减轻。与对照组相比,SiO_2组各时间相肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的蛋白表达显著升高,于SiO_2刺激后6 h开始升高,18 h达高峰,24 h与36 h回落,但仍高于对照组水平。3-MA组可以显著下调SiO_2组对应时间点肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达。结论:自噬抑制剂3-MA抑制肺泡巨噬细胞自噬后可以下调肺泡巨噬细胞中TNF-α和TGF-β的表达及释放,进而促进炎症损伤的修复。
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