噬菌体生物扩增法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药性测定

目前常规结核分枝杆菌(MTB)细菌学检查和药敏检测尚无法充分满足临床需要。以噬菌体为基础的结核分枝杆菌裂解试验,利用噬菌体生长快、特异性高的特性,快速准确地检测MTB,并进行药敏检测,近年来在结核病研究中备受关注1-2]。本研究采用噬菌体裂解法快速检测肺结核患者痰标本中的MTB,同时检测对异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(S)、乙胺丁醇(E)的敏感性,并与改良罗氏培养法分离细菌及比例法药敏结果进行比较,现报告如下。材料与方法一、材料1.标本来源:70份涂阳痰标本均取自我院结防门诊部2005、2006年临床确诊的肺结核患者。2.噬菌体生物扩增法(PhaB)检测试剂由上海金浩公司提供。3.指示细胞:购自国家菌种保藏中心。为快速生长的耻垢分枝杆菌。用液体培养基将处于对数生长期的耻垢分枝杆菌调至工作浓度为109菌落形成单位,4℃保存备用。4.药物及其浓度:R、H、E粉购自沈阳红旗制药厂,S购自上海信谊药厂。4种药物的试验浓度分别为:H0.4μg/ml、R 20μg/mlS、5μg/ml、E 5μg/ml。二、方法1.标本前处理:70份涂片阳性肺结核患者痰标本用4%的氢氧化钠-半胱氨酸37℃水浴震荡液化20 min...