用液相质谱法鉴定盐酸半附甲素在大鼠胆汁中I相和Ⅱ相代谢产物

目的：研究盐酸关附甲素在大鼠胆汁中的代谢产物。方法：建立了液相质谱和串联质谱法（LC－MS）对关附甲素及其代谢产物鉴定的方法。大鼠静脉注射盐酸关附甲素后采集胆汁，通过与对照化合物的色谱保留时间、分子离子峰、碎片离子峰和紫外图谱对照从而鉴定I相代谢物。胆汁经过葡萄糖醛酸酶或硫酸酯酶水解，鉴定其水解产物（苷元），从而确定Ⅱ相结合物，再通过LC－MS分离和确定分子离子峰，最后利用MS－MS寻找特征子离子和母离子的方法进行验证。结果：大鼠胆汁中存在I相代谢物关附壬素；Ⅱ相结合物经葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后，出现关附甲素和关附壬素；LC－MS检测发现胆汁中m/z 606和510两个准分子离子峰，推测分别为关附甲素葡萄糖醛酸苷和关附甲素硫酸酯；经MS－MS鉴定出m/z 606特征子离子m/z 177和m/z 430，进一步确证大鼠胆汁中存在关附甲素葡萄糖醛酸苷。结论：大鼠胆汁中存在I相代谢产物关附壬素，以及Ⅱ相结合物关附甲素葡萄糖醛酸和硫酸结合物、关附壬素葡萄糖醛酸和硫酸结合物。