肺炎嗜衣原体Cpn0425重组蛋白的克隆与表达及抗原性研究 |
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引用本文: | 肖光文,刘良专,徐磊,谢小平,吴移谋.肺炎嗜衣原体Cpn0425重组蛋白的克隆与表达及抗原性研究[J].中国人兽共患病杂志,2012(11):1061-1064. |
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作者姓名: | 肖光文 刘良专 徐磊 谢小平 吴移谋 |
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作者单位: | 南华大学病原生物研究所;嘉应学院医学院;南华大学附属第一医院检验科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.30870134/C010902)资助~~ |
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摘 要: | 目的构建重组质粒pGEX6p-2/Cpn0425,在E.coli BL21中进行诱导表达,纯化获得重组融合蛋白Cpn0425,并评价其抗原性。方法 PCR扩增肺炎嗜衣原体Cpn0425蛋白编码基因,构建pGEX6p-2/Cpn0425重组质粒,测序正确后在E.coli BL21中诱导表达,用SDS-PAGE和Western-Blot进行分析和鉴定。结果构建了重组质粒pGEX6p-2/Cpn0425,并在E.coli BL21菌中高效表达出Mr约为50kDa的GST-Cpn0425目的蛋白,超声裂解后SDS-PAGE分析目的蛋白在菌体细胞内以可溶性形式表达,经采用默克Novagen的GST纯化树脂纯化获得纯度在95%以上的重组蛋白。结论获得了Cpn0425基因片段,并在E.coli BL21中成功表达,GST-Cpn0425具有良好的抗原性。
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关 键 词: | 肺炎嗜衣原体 Cpn0425 Ⅲ型分泌系统 |
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