RA诱导P19细胞神经元分化过程中nestin基因的表达变化

目的 观察nestin基因在RA诱导P19细胞向神经分化过程中表达水平的变化,探讨nestin基因在神经分化过程中的特点.方法 P19细胞经1×10-6M视黄酸(RA)诱导悬浮培养4d形成细胞聚集体(aggregation),将聚集体用生长培养基黏附培养至12d,观察神经细胞分化情况,用神经元标记分子NF160对分化第10天的P19细胞进行免疫染色,观察其产生神经元情况,并采用RT-PCR技术对P19细胞、RA连续诱导培养的细胞聚集体以及细胞分化成熟的不同时段检测P19细胞中nestin基因的表达水平.结果 经RA成团诱导4d后,P19细胞向神经方向分化,随着分化时间延长逐渐形成神经网络;NF160对分化第10天的P19细胞检测呈阳性;nestin基因在P19细胞RA诱导前后皆有表达,在RA诱导P19细胞向神经元方向分化时表达水平逐渐上调,各时间点之间差异显著(P<0.05),而在随后P19细胞的分化过程中,随着P19神经元的成熟nestin基因的表达逐渐下降,直至接近于消失.结论 nestin基因在P19细胞向神经元诱导过程中表达逐渐上调,而在P19细胞神经元分化后表达明显下调,它参与神经元的分化和发育过程.