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| Ⅴ型腺病毒纤毛基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 付员根,温博贵,刘志国,吴开春,樊代明,王晓侠. Ⅴ型腺病毒纤毛基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2001, 17(6): 518-520 |
| 作者姓名： | 付员根 温博贵 刘志国 吴开春 樊代明 王晓侠 |
| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院生化与分子生物学教研室, 2. 第四军医大学全军消化病研究所 3. 西安交通大学第二医院耳鼻喉科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助,No.39970834军队"十五"医药卫生科研基金重点项目:No.01Z087 |
| 摘 要： | 目的克隆腺病毒纤毛基因,为构建腺病毒靶向性载体创造条件.方法应用限制性内切酶酶切技术,酶切腺病毒骨架质粒pAdEasy-1,经多次亚克隆最后完成克隆纤毛基因,并构建纤毛基因原核表达载体.用IPTG诱导纤毛蛋白的表达,再用SDS-PAGE和Westernblot对其进行分析.结果成功地克隆纤毛基因.质粒pBS/Fiber经限制性内切酶酶切鉴定及测序证实了其正确性.经质粒pQE/Fiber转化的细菌,在IPTG诱导下可表达一种新的蛋白,并于5h表达量最高.经Westernblot证实,在变性条件下表达蛋白的Mr为62 000,在非变性条件下为186 000.结论已克隆的纤毛基因能在大肠杆菌中表达,并具有三聚体结构,可用于腺病毒载体靶向性构建. |
| 关 键 词： | 腺病毒 纤毛 基因克隆 大肠肝菌 基因表达 |
| 文章编号： | 1007-8738(2001)06-518-03 |
| 修稿时间： | 2001-05-10 |
Cloning and expression of adenovirus type |
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| FUN Yuan-gen,LIU Zhi-guo,WEN Bo-gui,WANG Xiao-xia,WU Kai chun,FAN Dai-min. Cloning and expression of adenovirus type[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2001, 17(6): 518-520 | |
| Authors: | FUN Yuan-gen LIU Zhi-guo WEN Bo-gui WANG Xiao-xia WU Kai chun FAN Dai-min |
| Affiliation: | FUN Yuan-gen1,LIU Zhi-guo2,WEN Bo-gui1,WANG Xiao-xia3,WU Kai chun,FAN Dai-min21Department of Biochemisty and Molecular Biology,Shantou University Medical College,Shantou 515031,Guangdong Province,China.2Institute of Digestive Disease,Xijing Hospital |
| Abstract: | |
| Keywords: | adenovirus fiber gene cloning E.Coli gene expression |
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