| 糖基化修饰促进内含肽剪接的凝血因子Ⅷ的分泌和活性 |
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| 引用本文： | 朱甫祥,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳.糖基化修饰促进内含肽剪接的凝血因子Ⅷ的分泌和活性[J].中华医学杂志,2010,90(36). |
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| 作者姓名： | 朱甫祥 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 |
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| 作者单位： | 鲁东大学生命科学学院生物医学研究所,烟台,264025 |
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| 基金项目： | 教育部留学回国人员科研启动基金，山东省自然科学基金，烟台市科技发展计划基金 |
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| 摘 要： | 目的 观察糖基化修饰对内含肽剪接的B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)分泌的影响.方法 将含有6个潜在的天冬酰胺糖基化位点(N6)的FⅧ的B区226个氨基酸引入BDD-FⅧ重链,用双载体转融合内含肽的此重链和轻链基因(N6HCIntN和IntCLC)至培养的293细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Coatest发色法分别检测基因共转染细胞分泌至培养上清的剪接BDD-FⅧ蛋白量和凝血生物活性.结果 共转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞上清中BDD-FⅧ蛋白浓度为(123±18)ng/ml,凝血活性为(0.94±0.11)U/ml,明显高于共转染内含肽融合的无糖基化修饰重链(HCIntN)和IntCLC基因细胞上清的BDD-FⅧ蛋白浓度(86±12)ng/ml]和凝血活性(0.65±0.07)U/ml,均P＜0.05].分别转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞混合培养后的上清中亦检测到剪接的BDD-FⅧ蛋白和凝血活性(18±6)ng/ml,(0.15±0.05)U/ml].结论 糖基化修饰可促进内含肽剪接的BDD-FⅧ的分泌并表现出不依赖细胞机制的蛋白质剪接功能.
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| 关 键 词： | 因子Ⅷ 糖基化 蛋白质剪接 内含肽 |
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