抗磷脂抗体靶抗原-β_2糖蛋白的原核表达和鉴定 |
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引用本文: | 程烽
,卢爱薇
,谢飞
,兰风华.抗磷脂抗体靶抗原-β_2糖蛋白的原核表达和鉴定[J].福建医药杂志,2003(2). |
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作者姓名: | 程烽 卢爱薇 谢飞 兰风华 |
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作者单位: | 南京军区福州总医院分子医学开放实验室 350025 |
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摘 要: | 目的 构建 β2 糖蛋白 (β2 - GPI)的原核表达载体并诱导其表达。方法 利用 PCR技术从 β2 - GPI昆虫表达载体中扩增出编码β2 - GPI目的 DNA片段 ,将其插入 GST融合表达载体 p GEX- 2 T多克隆位点 ,以 IPTG诱导 GST融合 β2 - GPI的表达。结果 凝胶电泳显示昆虫表达载体的 PCR扩增产物的分子量大小与目的片段大小相符。对重组质粒 (p GEX- 2 T- β2 - GPI)分析表明 ,插入片段的序列与发表的 β2 - GPI基因编码序列一致。在 IPTG的诱导下 ,BL 2 1重组菌高效表达出一个分子量约为 6 4 k Da产物 ,与预期相符。结论 β2 - GPI编码序列已被克隆至 GST融合表达载体 p GEX- 2 T。
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关 键 词: | β2糖蛋白 分子克隆 原核表达 |
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