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人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建
引用本文:杜柳涛,庄志雄,高昆,杨杏芬,何云,徐雷,魏青.人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建[J].中山大学学报(医学科学版),2002,23(3):187-189.
作者姓名:杜柳涛  庄志雄  高昆  杨杏芬  何云  徐雷  魏青
作者单位:1. 中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室,广东广州,510089
2. 深圳市防疫站,广东深圳,518020
3. 中山大学生命科学学院,广东广州,510175
4. 广东省疾病控制中心,广东广州,510300
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (3 0 10 0 15 2 )
摘    要:【目的】克隆人类DNA聚合酶 (pol β)基因全长cDNA ,构建该基因的真核高效表达载体。【方法】抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT PCR扩增 ,用pGEM T载体经T/A克隆、DNA测序确定后 ,用双酶切将 pol β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体 pEGFP C1,转染大肠杆菌DH5α ,筛选阳性克隆 ,双酶切鉴定重组质粒。【结果】经RT PCR获得 1 0 3kb的产物 ,经DNA测序 ,确定所扩增片段为人类 pol β基因全长cDNA ,进而成功筛选出真核表达载体 pEGFP C1 β。【结论】成功构建人 pol β基因全长cDNA真核表达载体 ,为进一步建立该基因的高表达细胞株提供基础

关 键 词:DNA聚合酶β  聚合酶链反应  DNA  重组
文章编号:1000-257(2002)03-0187-03
修稿时间:2001年11月14

Cloninng and Sequencing of the Human DNA Polymerase β Entire cDNA and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector
DU Liu tao ,ZHUANG Zhi xiong ,GAO Kun ,Yang Xing fen ,He Yun ,Xu Lei ,Wei Qing ..Cloninng and Sequencing of the Human DNA Polymerase β Entire cDNA and Construction of Its Eukaryotic Expression Vector[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2002,23(3):187-189.
Authors:DU Liu tao  ZHUANG Zhi xiong  GAO Kun  Yang Xing fen  He Yun  Xu Lei  Wei Qing
Institution:DU Liu tao 1,ZHUANG Zhi xiong 2,GAO Kun 3,Yang Xing fen 4,He Yun 1,Xu Lei 1,Wei Qing 1.
Abstract:
Keywords:DNA polymerase beta  polymerase chain reaction  DNA  recombiant
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