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睾酮对3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白受体及下游信号蛋白的影响
引用本文:杨杨,温宇,王宏伟,胡秀芬,卢慧玲,魏俊.睾酮对3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白受体及下游信号蛋白的影响[J].武汉大学学报(医学版),2009,30(4).
作者姓名:杨杨  温宇  王宏伟  胡秀芬  卢慧玲  魏俊
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030;武汉科技大学附属天佑医院内分泌科,湖北,武汉,430064
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(30800385);;新教师基金项目(200804871059)
摘    要:目的:观察睾酮对3T3-L1(前)脂肪细胞促酰化蛋白(ASP)受体C5L2-mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达的影响,以及睾酮对3T3-L1(前)脂肪细胞Gαq/11,Gβ,p-PKCα和p-PKCζ蛋白以及ASP刺激的Gαq/11,Gβ,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达的影响。方法:体外培养3T3-L1细胞,诱导细胞分化,用不同浓度睾酮作用于3T3-L1(前)脂肪细胞,孵育过夜后收获细胞,采用RT-PCR和流式细胞仪检测ASP受体mRNA和蛋白表达情况;采用Western Blot法检测基础状态和ASP刺激的Gαq/11,Gβ,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。结果:睾酮呈浓度依赖性均抑制3T3-L1成熟脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白的表达,10-6mol/L时mRNA和蛋白分别减少了60%(P<0.01)和27%(P<0.01)。但前脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白表达水平均无显著性差异。高浓度(10-6mol/L)睾酮在一定程度上抑制ASP刺激的成熟脂肪细胞Gαq/11,Gβ,p-PKCα和p-PKCζ的表达,分别减少了52%(P<0.05),27%(P>0.05),50%(P<0.01)和57%(P<0.05);在前脂肪细胞,ASP-C5L2下游信号分子Gαq/11,Gβ,p-PKCα和p-PKCζ表达无明显抑制作用。结论:睾酮抑制成熟脂肪细胞ASP信号分子表达,睾酮诱导ASP抵抗的发生机制与下调脂肪细胞表面ASP受体功能有关,与干扰ASP-C5L2信号转导途径有关。ASP抵抗参与了高睾酮引起的胰岛素抵抗状态的病理生理过程,ASP抵抗可能参与多囊卵巢综合征(PCOS)、肥胖症等多种疾病的病理生理过程。

关 键 词:成熟脂肪细胞  前脂肪细胞  胰岛素抵抗  促酰化蛋白抵抗  睾酮

Effect of Testosterone on Acylation Stimulating Protein-Receptor C5L2 Pathway in 3T3-L1 Adipocytes and Preadipocytes
YANG Yang,WEN Yu,WANG Hongwei,HU Xiufen,LU Huiling,WEI Jun.Effect of Testosterone on Acylation Stimulating Protein-Receptor C5L2 Pathway in 3T3-L1 Adipocytes and Preadipocytes[J].Medical Journal of Wuhan University,2009,30(4).
Authors:YANG Yang  WEN Yu  WANG Hongwei  HU Xiufen  LU Huiling  WEI Jun
Institution:YANG Yang1,2,WEN Yu1,WANG Hongwei1,HU Xiufen1,LU Huiling1,WEI Jun11Dept.of Pediatrics,Tongji Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science , Technology,Wuhan 430030,China2Dept.of Endocrinology,Affiliated Tianyou Hospital,Wuhan University of Science , Technology,Wuhan 430064,China
Abstract:Objective: To evaluate potential acylation stimulating protein(ASP) resistance in both adipocytes and preadipocytes under the conditions of insulin resistance induced by testosterone on both receptor level and post-receptor level.Methods: 3T3-L1 preadipocytes were cultured and differentiated,and the adipocytes and preadipocytes were treated with 0(testosterone-free DMEM/F12),10-8,10-7,and 10-6 mol/L testosterone overnight.RT-PCR and flow cytometry were used to detected mRNA and cell surface expression of AS...
Keywords:Adipocytes  Preadipocytes  Insulin Resistance  ASP Resistance  Testosterone  
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