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登革2型病毒全长NS1基因真核表达载体的构建及序列分析
引用本文:曾祥凤,江丽芳,邵焰,方丹云,魏惠永.登革2型病毒全长NS1基因真核表达载体的构建及序列分析[J].热带医学杂志,2004,4(6):662-665.
作者姓名:曾祥凤  江丽芳  邵焰  方丹云  魏惠永
作者单位:1. 中山大学基础医学院微生物学教研室,广州,510080;暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广州,510632
2. 中山大学基础医学院微生物学教研室,广州,510080
摘    要:目的克隆登革2型病毒(DEN2)全长NS1基因,构建NS1基因的真核表达重组质粒。方法用RT—PCR技术扩增DEN2(NGC株)全长的NSl基因序列,并定向克隆入pPICZαB的KpnⅠ/XbalⅠ位点,构建真核表达载体pPICZαB—NS1,转化E.coli DH5a菌。阳性重组质粒用PCR、酶切及序列测定等方法鉴定。结果阳性质粒经PCR及KpnⅠ/XbaⅠ双酶切获得了一个核苷酸长度为1134bp的基因;序列测定证实该基因与DEN2(NGC株AF038403)NS1基因序列有99%同源。结论成功构建了含有DEN2全长NS1基因的真核表达载体DPICZαB—NS1,为NS1的进一步酵母表达奠定了良好的基础。

关 键 词:登革病毒  NS1基因  克隆  测序  真核表达
文章编号:1672-3619(2004)06-0662-04
修稿时间:2004年9月2日

Cloning and Sequence Analysis of Dengue 2 Virus NS1 Gene and the Construction of Eukaryotic Expression Plasmid
ZENG Xiang feng,JIANG Li fang,SHAO Yan,FANG Dan yun,WEI Hui yong.Cloning and Sequence Analysis of Dengue 2 Virus NS1 Gene and the Construction of Eukaryotic Expression Plasmid[J].Journal Of Tropical Medicine,2004,4(6):662-665.
Authors:ZENG Xiang feng    JIANG Li fang  SHAO Yan  FANG Dan yun  WEI Hui yong
Institution:ZENG Xiang feng1,2,JIANG Li fang1*,SHAO Yan1,FANG Dan yun1,WEI Hui yong1
Abstract:
Keywords:dengue virus  NS1 gene  cloning  sequencing  eukaryotic expression
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