聚合酶链反应—微孔板杂交技术用于乙型肝炎病毒DNA的检测

目的：建立乙肝病毒DNA的聚合酶链反应（PCR）－微孔板杂交法，使PCR结果判定更加客观。方法：我们使用煮沸裂解法提取模板DNA，将PCR引物5′端标记生物素，用PCR产物与包被有亲和素的微孔板结合，并与含荧光素特异探针杂交，酶标记抗荧光素抗体与之结合进行显色反应，通过测定其吸光度来判断结果，结果：所建立的PCR－微孔板杂交法的阳性检出率（68／160）比PCR－电泳地（60／160）高，检测时间约是Keller法的1／10。结论：该法较敏感、特异和客观地检测临床标本中的乙型肝炎病毒DNA。