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hTERT启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒载体的构建和制备
引用本文:谢于,张子祥,朱兴国,李德春.hTERT启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒载体的构建和制备[J].苏州大学学报(自然科学版),2006,26(6):939-942.
作者姓名:谢于  张子祥  朱兴国  李德春
作者单位:苏州大学附属第一医院普外科 江苏苏州215006
摘    要:目的构建人端粒酶逆转录酶启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒的真核表达载体,为进一步研究其在体内外实验提供依据。方法PDC312-TP质粒和PSUCMV-TK质粒经EcoR I,Sal I酶切连接构建PDC312-TP-TK,将质粒PDC312-TP-TK与含有5型腺病毒右臂的质粒Pbhge3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,经同源重组产生重组腺病毒PSG-TP-TK,PSG-TP-TK在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。结果质粒PDC312-TP-TK经酶切鉴定正确,扩增得到的PSG-TP-TK经PCR扩增证实为hTERT启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒,腺病毒滴度为1.9×1010pfu/ml。结论该实验为重组腺病毒PSG-TP-TK用于肿瘤的基因治疗打下了基础。

关 键 词:人端粒酶逆转录酶启动子  单纯疱疹病毒胸苷激酶基因  腺病毒
文章编号:1673-0399(2006)06-0939-04
收稿时间:2005-11-10
修稿时间:2005年11月10

Construction of Recombinant Adenovirus Vector Expressing the hsv-tk Gene Under the hTERT Promoter
Abstract:
Keywords:
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