藁本内酯对谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 |
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作者姓名: | 吴倩 汪宁 王艳 汪光云 朴新新 |
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作者单位: | 新安医学省部共建教育部重点实验室,安徽省中医药科学院中药药效与安全性评价研究所,安徽中医药大学药学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81374005);十二五科技支撑计划项目(2012BAI26B03);2013年度安徽省学术及技术带头人及后备人选科研活动经费资助项目 |
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摘 要: | 研究藁本内酯对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的保护作用。采用MTT比色法检测细胞存活率;Annexin V-FITC/propidium iodide(PI)双染法流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率;Fluo-3/AM荧光染色法检测钙离子含量;Western blot法检测线粒体和胞浆中细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。结果显示,谷氨酸具有细胞毒性,其半数抑制浓度(IC50)为15 mmol·L-1;不同浓度藁本内酯(1、5、15μmol·L-1)预处理可显著提高细胞存活率。与正常对照组相比,谷氨酸单独给药组的细胞凋亡率为13.39%;藁本内酯给药组(1、5、15μmol·L-1)使细胞的凋亡率分别减少到9.06%、6.48%和3.82%。并且藁本内酯可以显著减少谷氨酸所致的钙离子内流,Western blot结果显示,藁本内酯可能通过减少线粒体Cyt C的释放,抑制Caspase-3活性,同时升高Bcl-2/Bax比值来保护谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡。结果表明,藁本内酯对谷氨酸诱导PC12细胞的凋亡具有保护作用。该保护作用可能与抑制细胞内钙离子内流及阻断Cyt C从线粒体释放入胞浆有关。
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关 键 词: | 藁本内酯 PC12细胞 谷氨酸 钙离子 细胞色素C 细胞凋亡 |
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