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人端粒酶蛋白催化亚单位基因转染对人胚胎成纤维细胞增殖的影响
引用本文:梁光萍,罗向东,杨宗城. 人端粒酶蛋白催化亚单位基因转染对人胚胎成纤维细胞增殖的影响[J]. 中华烧伤杂志, 2005, 21(1): 30-32
作者姓名:梁光萍  罗向东  杨宗城
作者单位:400038,重庆,第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30000072)
摘    要:目的探讨外源性人端粒酶蛋白催化亚单位(hTERT)基因转染对人胚胎成纤维细胞(hEF)增殖的影响。方法体外培养hEF。应用脂质体转染法将pIRES2增强性绿色荧光蛋白(EGFP)hTERT正义重组质粒及pIRES2EGFP空载质粒分别导入hEF中,相应称为hEFhTERT和hEFEGFP。采用蛋白质印迹法(Westernblot)检测正常hEF、hEFhTERT、hEFEGFP中hTERT蛋白、分化抑制因子Id1、增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达水平。用噻唑蓝(MTT)法测定3种细胞的生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期并计算增殖指数(PI)。结果(1)Westernblot与hEFEGFP和hEF比较,hEFhTERT中的hTERT蛋白、Id1、PCNA和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平均较高。(2)MTT法细胞接种后第4—6天,hEFhTERT的吸光度(A)值明显高于hEF和hEFEGFP(P<005),接种后1—6dhEF与hEFEGFP的A值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)细胞周期与hEFEGFP和hEF比较,hEFhTERTG0/G1期细胞较少,S、G2/M期细胞较多;其PI为5747%,高于hEFEGFP(13.13%)和hEF(17.38%)。结论外源性hTERT基因转染可使hEF增殖能力增强。

关 键 词:端粒  末端转移酶  成纤维细胞  转染  细胞增殖
修稿时间:2004-03-26

Influence of human telomerase reverse transcriptase gene transfection on the proliferation of human embryonic fibroblasts
LIANG Guang-ping,LUO Xiang-dong,YANG Zong-cheng. Influence of human telomerase reverse transcriptase gene transfection on the proliferation of human embryonic fibroblasts[J]. Chinese journal of burns, 2005, 21(1): 30-32
Authors:LIANG Guang-ping  LUO Xiang-dong  YANG Zong-cheng
Affiliation:Institute of Burn Research, Southwest Hospital, State key Laboratory of Trauma, Burns and Combined Injury, The Third Military Medical University, Chongqing 400038. P.R. China.
Abstract:
Keywords:Telomerase  Fibroblasts  Transfection  Cell proliferation
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