含hBDNF cDNA和HTH_1 cDNA两个转录单位表达质粒的构建及在CHO细胞的表达 |
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引用本文: | 应其龙,彭鲁英,王德春,张乃娴,宋后燕.含hBDNF cDNA和HTH_1 cDNA两个转录单位表达质粒的构建及在CHO细胞的表达[J].复旦学报(医学版),1999(3). |
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作者姓名: | 应其龙 彭鲁英 王德春 张乃娴 宋后燕 |
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作者单位: | 上海医科大学基础医学院分子遗传学教研室,中山医院骨科 |
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摘 要: | 在CHO细胞同时表达hBDNF和HTH1cDNA两个外源基因。方法构建同时含hBDNFcDNA和HTH1cDNA两个转录单位的表达质粒并转染CHO细胞,筛选出同时表达hBDNF和HTH1的克隆命名为CHOhBDNFHTH1细胞;用双重免疫组化、westernbloting及活性测定等方法检测外源HTH1、hBDNF基因在CHOhBDNFHTH1细胞的表达。结果hBDNF、HTH1同时在CHOhBDNFHTH1细胞得到表达;HPLC-ECD法检测到CHO-hBDNF-HTH1细胞培液中L-DOPA含量为每24h(25.3±6.7)ng/106cels;CHO-hBDNF-HTH1细胞培液可明显促进人胚脊神经根节细胞的存活和生长。结论采用多基因表达技术可以使hBDNF和HTH1cDNA两个外源基因同时在一个细胞中得到表达,而且表达的hBDNF、HTH1具有生物学活性
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关 键 词: | 酪氨酸羟化酶 脑源性神经营养因子 基因表达 |
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