| 含hBDNF cDNA和HTH_1 cDNA两个转录单位表达质粒的构建及在CHO细胞的表达 |
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| 引用本文： | 应其龙,彭鲁英,王德春,张乃娴,宋后燕.含hBDNF cDNA和HTH_1 cDNA两个转录单位表达质粒的构建及在CHO细胞的表达[J].复旦学报(医学版),1999(3). |
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| 作者姓名： | 应其龙 彭鲁英 王德春 张乃娴 宋后燕 |
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| 作者单位： | 上海医科大学基础医学院分子遗传学教研室，中山医院骨科 |
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| 摘 要： | 在ＣＨＯ细胞同时表达ｈＢＤＮＦ和ＨＴＨ１ｃＤＮＡ两个外源基因。方法构建同时含ｈＢＤＮＦｃＤＮＡ和ＨＴＨ１ｃＤＮＡ两个转录单位的表达质粒并转染ＣＨＯ细胞，筛选出同时表达ｈＢＤＮＦ和ＨＴＨ１的克隆命名为ＣＨＯｈＢＤＮＦＨＴＨ１细胞；用双重免疫组化、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ及活性测定等方法检测外源ＨＴＨ１、ｈＢＤＮＦ基因在ＣＨＯｈＢＤＮＦＨＴＨ１细胞的表达。结果ｈＢＤＮＦ、ＨＴＨ１同时在ＣＨＯｈＢＤＮＦＨＴＨ１细胞得到表达；ＨＰＬＣ－ＥＣＤ法检测到ＣＨＯ－ｈＢＤＮＦ－ＨＴＨ１细胞培液中Ｌ－ＤＯＰＡ含量为每２４ｈ（２５．３±６．７）ｎｇ／１０６ｃｅｌｓ；ＣＨＯ－ｈＢＤＮＦ－ＨＴＨ１细胞培液可明显促进人胚脊神经根节细胞的存活和生长。结论采用多基因表达技术可以使ｈＢＤＮＦ和ＨＴＨ１ｃＤＮＡ两个外源基因同时在一个细胞中得到表达，而且表达的ｈＢＤＮＦ、ＨＴＨ１具有生物学活性
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| 关 键 词： | 酪氨酸羟化酶 脑源性神经营养因子 基因表达 |
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