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牙龈卟啉菌脂多糖诱导HL-60细胞分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及其相关Toll样受体和信号通路的差异
引用本文:张迪亚,严杰,李盛来,陈莉丽. 牙龈卟啉菌脂多糖诱导HL-60细胞分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及其相关Toll样受体和信号通路的差异[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2007, 27(10): 954-959
作者姓名:张迪亚  严杰  李盛来  陈莉丽
作者单位:1. 浙江大学医学院附属第二医院口腔科,杭州,310009
2. 浙江大学医学院病原生物学系
3. 浙江大学医学院附属口腔医院
基金项目:国家自然科学基金面上项目(30471888)
摘    要:目的探讨牙龈卟啉菌(Porphyromonasgingivalis)脂多糖诱导人粒细胞HL-60分泌IL-lβ、TNF-α、IL-6能力差异及其相关T0u样受体和信号通路。方法采用酚水法提取牙龈卟啉菌ATCC33277株脂多糖(Pg—LPS)。采用ELISA试剂盒定量检测Pg—LPS作用的HL-60细胞分泌IL-lβ、TNF-α和IL-6水平。采用TLR2或心单克隆抗体阻断试验联合ELISA检测,了解Pg—LPS结合靶细胞上Toll样受体的类型。采用JNK、P38MAPK和NF-kB通路特异性阻断剂的阻断试验联合ELISA检测,了解Pg—LPS诱导HL-60细胞分泌IL-lβ、TNF-α和IL-6的相关胞内信号传导通路。实验中采用大肠杆菌O111:B4脂多糖(E-LPS)作为对照。结果1μg/ml Pg—LPS分别作用2,4、48和48h或1μg/ml E—LPS分别作用48、48和72h,HL-60细胞分泌的IL-1β、TNF-α和IL-6水平明显升高(P〈0.01);Pg—LPS诱生的TNF-α最高浓度与E-LPS相近(P〉0.05),但诱生的IL-Iβ和IL-6最高浓度明显高于E—LPS(P〈0.05)。TLR2单抗可抑制Pg—LPS诱导HL-60细胞分泌IL-lβ、TNF-α或IL-6的活性(P〈0.05),但BLPS诱导HL-60细胞分泌上述3种细胞因子的活性仅可被TLR4单抗所抑制(P〈0.05)。Pg—LPS诱导HL-60细胞分泌IL-lβ、TNF-α和IL-6的信号通路分别为JNK和NF-kB、JNK和P38MAPK及NF-kB、JNK和P38MAPK(P〈0.05),E-LPS则分别为JNK和P38MAPK及NF-kB、P38MAPK和NF-kB、P38MAPK和NF-kB(P〈0.05)。结论Pg—LPS诱导HL-60细胞分泌IL-lβ、TNF-α和IL-6活性高于E-LPS。TLR2和11尉分别可能是Pg—LPS和E-LPS的受体。Pg-LPS诱导HL-60细胞合成上述细胞因子的信号传导通路与E-LPS明显不同,不同细胞因子合成的胞内信号传导通路也不尽相同。

关 键 词:牙龈卟啉菌 脂多糖 HL-60细胞 细胞因子 LPS受体 信号传导通路
修稿时间:2006-08-10

Diversity of Porphyromonad gingivalis lipopolysaccharide induced IL-1β, TNF-α and IL-6 levels in HL-60 cells and the associated Toll-like receptors and signaling pathways
ZHANG Di-ya,YAN Jie,LI Sheng-lai,CHEN Li-li. Diversity of Porphyromonad gingivalis lipopolysaccharide induced IL-1β, TNF-α and IL-6 levels in HL-60 cells and the associated Toll-like receptors and signaling pathways[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2007, 27(10): 954-959
Authors:ZHANG Di-ya  YAN Jie  LI Sheng-lai  CHEN Li-li
Abstract:
Keywords:Porphyromonad gingivalis   Lipopolysaccharide   HL-60 cell   Cytokines   LPS receptor  Signal transduction pathway
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