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LPS对大鼠肺微血管内皮细胞SSeCKS的表达影响
引用本文:刘海鸥,沈爱国,孙琳琳,肖峰,周丹,程纯. LPS对大鼠肺微血管内皮细胞SSeCKS的表达影响[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2007, 27(10): 893-897
作者姓名:刘海鸥  沈爱国  孙琳琳  肖峰  周丹  程纯
作者单位:1. 南通大学航海医学研究所,226001
2. 226001,南通大学神经再生重点实验室;226001,南通大学微生物教研室
3. 南通大学微生物教研室,226001
基金项目:国家自然科学基金资助(30300099,30770488);江苏省自然科学基金资助(BK2003035);江苏省高校自然科学基金资助(03KJBl80109)
摘    要:目的研究细菌脂多糖(LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cell,RPMVEC)Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)表达和细胞内定位的影响,探讨SSeCKS参与细胞骨架结构改变的可能机制。方法用植块培养法体外培养大鼠肺微血管内皮细胞,用抗大鼠CD31抗体进行细胞鉴定。LPS刺激体外培养的RPMVEC,用定量PCR、免疫印迹方法检测LPS刺激RPMVEC不同时间SSeCKS mRNA和蛋白的表达情况;用0.05μmol/L蛋白激酶C(PKC)抑制剂(Calphostin C)预处理RPMVEC30min后再用LPS刺激6h,免疫荧光细胞化学法观察Calphostin C对LPS诱导SSeCKS与纤维状肌动蛋白(filamentous—actin,F-actin)细胞内定位和结构改变的影响。结果定量PCR结果显示LPS刺激RPMVEC1h后SSeCKS表达水平达到最高,Westernblot结果与定量PCR结果相一致,同时,LPS以时间依赖的方式诱导SSeCKS磷酸水平增加。免疫荧光结果显示LPS刺激后,F-actin发生重构,细胞内形成应力纤维,SSeCKS向核周、细胞膜纤维、板状伪足末端聚集;Calphostin C部分抑制LPS对内皮细胞F-actin和SSeCKS细胞内定位改变的影响。结论LPS能够诱导内皮细胞SSeCKS表达增加和细胞内定位改变,PKC参与I娲诱导内皮细胞F-ac,6n的重构和SSeCKS重新分布;提示SSeCKS可能与LPS诱导内皮细胞F-actin的重构有关。

关 键 词:内皮细胞 Src抑制的蛋白激酶C的底物 脂多糖
修稿时间:2006-10-08

Effects of LPS on the expression on SSeCKS at endothelial cell
LIU Hai-ou,SHEN Ai-guo,SUN Lin-lin,XIAO Feng,ZHOU Dan,CHENG Chun. Effects of LPS on the expression on SSeCKS at endothelial cell[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2007, 27(10): 893-897
Authors:LIU Hai-ou  SHEN Ai-guo  SUN Lin-lin  XIAO Feng  ZHOU Dan  CHENG Chun
Abstract:
Keywords:Endothelial cell   Src-suppressed C kinase substrate   Lipopolysaccharide
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