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| 膜芯片技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体、淋病奈瑟菌和3种支原体的方法学研究 | |
| 引用本文： | 向华国,熊礼宽,刘小立,苏放明,涂植光. 膜芯片技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体、淋病奈瑟菌和3种支原体的方法学研究[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2007, 27(8): 758-761 |
| 作者姓名： | 向华国 熊礼宽 刘小立 苏放明 涂植光 |
| 作者单位： | 1. 518103,深圳市福永医院 2. 518020,深圳市慢性病防治院性病防治中心 3. 深圳市人民医院 4. 重庆医科大学医学检验系 |
| 基金项目： | 深圳市科研基金项目（2005116） |
| 摘 要： | 目的建立和评价一个新的多重PCR．反向线点杂交技术（RIJB）快速同时检测泌尿生殖道沙眼衣原体（Ct）、淋病奈瑟菌（坛）和3种支原体感染的方法。方法分别选择Ct隐蔽质粒和Ng16SrRNA基因设计两对特异性引物，以支原体内转录间隔序列（ITS）设计一对支原体属通用引物，生物素标记下游引物。构建三重PCR同时扩增Ct、Ng、解脲脲原体（仇）、微小脲原体（跏）、人型支原体（Mh）等菌DNA，然后与固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷酸探针杂交。并对142份经荧光定量PCR（FQ-PCR）检测0和坛的性病高危人群标本，以及45份经支原体液体培养法鉴定的标本进行检测。结果多重PCR可同时扩增Ct、Ng、Uu、Up和Mh标准菌株DNA，其PCR产物的片段长度为208～408bp。97份FQ-PCRCt阳性标本中有93份经多重PCR-RLB检测为Ct阳性，45份FQ-PCRCt阴性标本中35份多重PCR-RLB阴性。41份FQ-PCRNg阳性标本中34份多重PCR-RLBNg阳性，101份FQ-PCRNg阴性标本中98份多重PCR-RLB阴性。其中36份经多重PCR-RLB检测为混合感染。32份支原体液体培养阳性标本中28份多重PCR-RLB阳性，13份支原体培养阴性标本经多重PCR-RLB检测均为阴性。结论多重PCR-RLB可快速同时检测Ct、Ng、Uu、Up和Mh，为性传播疾病的临床诊断提供了一种可靠的方法。 |
| 关 键 词： | 聚合酶链反应 核酸杂交 沙眼衣原体 淋病奈瑟菌 支原体 寡核苷酸探针 |
| 修稿时间： | 2006-09-18 |
Multiplex PCR based on reverse line hybridization macroarray for simultaneous detection genitourinary Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae and Mycoplasmas |
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| XIANG Hua-guo,XIONG Li-kuan,LIU Xiao-li,SU Fang-ming,TU Zhi-guang. Multiplex PCR based on reverse line hybridization macroarray for simultaneous detection genitourinary Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae and Mycoplasmas[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2007, 27(8): 758-761 | |
| Authors: | XIANG Hua-guo XIONG Li-kuan LIU Xiao-li SU Fang-ming TU Zhi-guang |
| Affiliation: | Fuyong Hospital, Shenzhen 518103 , China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Polymerase chain reaction Nucleic acid hybridization Chiamydia trachomatis Neissedagonorrhoeae Mycopiasmas Oligonucleotide probe |
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