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| 人源抗呼吸道合胞病毒基因工程单克隆抗体Fab段基因的筛选和表达 | |
| 引用本文： | 肖玮,梁米芳,钱渊,邓洁,李川. 人源抗呼吸道合胞病毒基因工程单克隆抗体Fab段基因的筛选和表达[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2007, 27(7): 587-592 |
| 作者姓名： | 肖玮 梁米芳 钱渊 邓洁 李川 |
| 作者单位： | 1. 100021,北京,中国医学科学院肿瘤医院 2. 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 3. 100020,北京,首都儿科研究所病毒研究室,北京感染与免疫中心实验室 |
| 基金项目： | 北京市自然科学基金重点项目（7001005）;北京市科委项目（H010910060113） |
| 摘 要： | 目的采用噬菌体表面呈现和重组抗体技术构建人噬菌体抗体基因库，筛选获得人源抗呼吸道合胞病毒（RSV）Fab段基因并在原核细胞中表达。为研制安全、有效的预防和治疗RSV感染的制剂奠定基础。方法从RSV感染患儿恢复期外周血淋巴细胞中提取细胞总RNA，用一组人IgGF出特异性引物，通过RT—PCR扩增得到一组轻链（κ和λ）和重链Fab段基因，并将此轻链和重链基因片段克隆于pComb3噬菌体载体，电转化XL1-Blu菌构建成抗RSV噬菌体抗体基因库。用纯化病毒颗粒作抗原对此抗体库进行了富集筛选，得到了特异性针对RSV的人源单克隆抗体Fab段基因，并在大肠杆菌中获得有效表达。用ELISA方法检测了此Fab抗体的抗原特异性，并对阳性克隆进行了基因序列分析。结果所构建的抗体库库容为108，从此抗体库中筛选得到的阳性克隆所表达的Fab抗体能与RSV纯化抗原特异性结合，保留了对RSV的抗原特异性。核苷酸序列分析证实，所获得的阳性克隆基因为人源IgG基因。结论本实验获得了特异性抗RSVFab抗体基因并在大肠杆菌中获得表达，表达产物能与RSV抗原特异性结合。 |
| 关 键 词： | 呼吸道合胞病毒 噬菌体表面表达 人源基因工程单克隆抗体 |
| 修稿时间： | 2006-04-21 |
Generation of human monoclonal antibody Fab fragments against respiratory syncytial virus(RSV)using phage display technology |
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| XIAO Wei,LIANG Mi-fang,QIAN Yuan,DENG Jie,LI Chuan. Generation of human monoclonal antibody Fab fragments against respiratory syncytial virus(RSV)using phage display technology[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2007, 27(7): 587-592 | |
| Authors: | XIAO Wei LIANG Mi-fang QIAN Yuan DENG Jie LI Chuan |
| Affiliation: | Laboratory of Virology , Beijing Municipal Inboratory of Infection and Immunity , Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Respiratory syncytial virus Phage display technique Human genetically engineered monoclonal antibody |
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