肿瘤坏死因子α真核表达载体的构建

目的：克隆人肿瘤坏死因子α（TNF-α），构建真核表达载体pEGFP—C1／hTNF-α。方法：以总RNA为模板，应用RT—PCR方法扩增TNF-α上游序列长约702bp的片段，克隆入绿色荧光蛋白GFP的基因下游，测序鉴定。结果：DNA测序结果与GeneBank中TNF-αmRNA序列（NM-000594）完全一致，片段长度为702bp。结论：人肿瘤坏死因子的真核表达载体pEGFP—C1／hTNF-α构建成功，为TNF-α功能的进一步研究奠定了基础。