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表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定
引用本文:涂晓欣,张洁,孟繁荣,方毅敏,杨芳芳,赖小敏.表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定[J].中华微生物学和免疫学杂志,2015(1).
作者姓名:涂晓欣  张洁  孟繁荣  方毅敏  杨芳芳  赖小敏
作者单位:1. 510080 广州,中山大学中山医学院微生物学教研室,热带病防治研究教育部重点实验室,海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室,广东省重大传染病预防和控制技术中心
2. 广州市胸科医院
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81271779);十二·五传染病重大专项分任务
摘    要:目的:转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体( TCR)双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT/V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT/V5-His A质粒、pMT/Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中,用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体,并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体,且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系,为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。

关 键 词:γδT细胞受体  双链单体  S2细胞
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