| 摘 要： | 目的:在细胞水平上分析高表达OAZI-1的小鼠B16-F1细胞能否活化抗原提呈细胞,促进抗原提呈细胞对肿瘤的吞噬以及抗原递呈作用。方法:转染重组质粒后,用RT-PCR和Western blot技术筛选获得高表达OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/OAZI-1),同时构建转染空载体质粒p CDNA3.1(+)的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/3.1)用作实验对照。制备BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞和骨髓来源的树突状细胞(DC),将B16/OAZI-1和B16/3.1分别与小鼠腹腔巨噬细胞和DC按照1∶5和1∶1的细胞个数比例混合培养4 h,流式细胞术检测巨噬细胞和DC对肿瘤细胞的吞噬率。将B16/OAZI-1和B16/3.1分别与小鼠DC按照1∶5的细胞个数比例混合培养24 h后,流式细胞术检测DC表面分子CD40、CD80和CD86表达的变化。将经肿瘤细胞活化的DC与小鼠脾淋巴细胞混合培养24 h后,ELISA检测细胞上清中IFN-γ的含量。结果:巨噬细胞和DC对B16/OAZI-1细胞吞噬率分别为24.7%和53.9%,与B16/3.1细胞(8.2%和13.8%)相比有较显著性差异。与B16/3.1细胞相比,DC细胞与B16/OAZI-1细胞混合培养24 h后,成熟DC细胞表面分子标志CD40、CD80、CD86的表达分别从24.2%、20.8%和16.4%增加到46.8%、32.5%和36.1%(P0.05);经B16/OAZI-1细胞活化的DC与小鼠脾淋巴细胞混合培养后,细胞上清中IFN-γ的含量为32.9 pg/ml,与B16/3.1细胞处理的DC相比(15.1 pg/ml)有显著性差异(P0.05)。结论:高表达OAZI-1的肿瘤细胞能更有效地被巨噬细胞和DC细胞吞噬,且这一过程能诱导DC细胞成熟活化,成熟的DC细胞将肿瘤抗原递呈给T淋巴细胞并诱导T淋巴细胞活化,从而激活机体抗肿瘤免疫应答。
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