食管癌ECA109细胞中Survivin shRNA干扰对核因子κB表达的影响及调控机制 |
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引用本文: | 李秀梅,陈艳,姜孝芳,李卉郭琼李惠武谌宏鸣.食管癌ECA109细胞中Survivin shRNA干扰对核因子κB表达的影响及调控机制[J].解剖学报,2015,46(4):514-520. |
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作者姓名: | 李秀梅 陈艳 姜孝芳 李卉郭琼李惠武谌宏鸣 |
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作者单位: | 新疆医科大学1. 形态学中心; 2. 生物化学教研室; 3. 科研中心; 4. 组织学胚胎学教研室,乌鲁木齐 830011 |
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摘 要: | 目的探讨Survivin作为基因表达调控因子,对核因子κB(NF-κB)基因的转录及蛋白水平活性的影响及与NF-κB的调控关系。方法采用Survivin短发夹RNA(shRNA)干扰技术,脂质体转染食管癌ECA109细胞,检测Survivin沉默效果,选择最佳转染浓度;半定量RT-PCR检测Survivin shRNA干扰后食管癌ECA109细胞中NF-κB及其通路的上游调控因子核因子κB抑制蛋白α(IKKα)、IKKβ表达变化;Western blotting方法检测NF-κB蛋白的表达变化;流式细胞术检测干扰之后食管癌ECA109细胞增殖、凋亡指数的变化。结果 Survivin shRNA干扰食管癌ECA109细胞后,Survivin mRNA和蛋白表达明显下调;NF-κB mRNA表达变化无明显差异,但其蛋白磷酸化水平降低,NF-κB上游因子IKKα、IKKβmRNA表达下调;食管癌ECA109细胞凋亡明显增加,G2期细胞比例增加,S期细胞减少,细胞周期受阻。结论 Survivin通过在转录水平影响IKKα、IKKβmRNA表达,调控NF-κB蛋白活化水平,提示Survivin在肿瘤信号调控网络中可作为一个新的基因表达调控因子。
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关 键 词: | 食管癌 Survivin 短发夹RNA 反转录-聚合酶链反应 |
收稿时间: | 2015-01-06 |
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