Fugene6—一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法

目的 建立一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法。方法 采用一种新的非脂质体基因转染试剂Fu-gene6，以人p14ARF蛋白表达载体（pCI-neo-p14ARF)为外源DNA，转染存在p14ARF基因原发缺失的人H460，A549，U251和PC-3共4个癌细胞系，通过G418筛选21d确定转染效率。结果 经转 染的4个细胞系培养孔中均长出了抗G418细胞克隆，而且这些细胞克隆的p14ARF基因PCR产物均为阳性。细胞毒性分析发现高浓度Fugene6作用下各细胞的殖活力未受影响。结论 Fugene6为一简便快速、易操作、重复性好且无细胞毒性的体外真核表达载体基因转染新系统。