五虎汤抑制STAT3蛋白调控树突细胞自噬治疗RSV诱发哮喘小鼠

目的 探讨五虎汤对呼吸道合胞病毒（RSV）诱发哮喘小鼠模型的治疗作用机制、肺组织信号传导及转录激活因子3（STAT3）蛋白表达的影响。方法 100只SPF级雌性BALB/c小鼠，用RSV复合鸡卵清蛋白（OVA）雾化吸入激发哮喘，造模成功后随机分为正常组、模型组、阳性药组（地塞米松，1.82 mg·kg^-1），STAT3抑制剂组（STATTIC，3.75 mg·kg^-1），STAT3诱导剂组（colivelin，1.0 mg·kg^-1）及五虎汤低、中、高剂量组（1.6，3.2，6.4 g·kg^-1），并给予相应药物干预2周。使用动物呼吸机检测小鼠气道反应性值；采用苏木素-伊红（HE），过碘酸希夫（PAS）及马松（Masson）染色分别观察小鼠肺组织病理学改变、杯状细胞分泌黏液和气道胶原沉积情况；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-10（IL-10），白细胞介素-17（IL-17）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定转化生长因子-β₁（TGF-β₁），α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA） mRNA在肺组织中的表达；透射电镜检查肺组织自噬体；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织树突细胞（DC）中自噬相关蛋白5（ATG5），Sequestosome 1（SQSTM1）蛋白表达及肺组织中STAT3，磷酸化（p）-STAT3蛋白表达情况。结果 与正常组比较，模型组小鼠气道反应性增高（P<0.01），肺组织周围炎性细胞浸润，杯状上皮细胞过度化生和气道胶原广泛沉积，血清中IL-6和IL-17含量显著升高，IL-10含量显著降低（P<0.01），肺组织中TGF-β₁，α-SMA mRNA表达增加（P<0.01），肺组织自噬体数量增加，肺组织DC中ATG5蛋白表达上升，SQSTM1表达降低（P<0.01），肺组织中STAT3，p-STAT蛋白表达水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，五虎汤和STATTIC均可明显降低哮喘小鼠气道高反应性（P<0.05，P<0.01），有效缓解RSV诱发哮喘小鼠肺组织病理情况，降低血清中IL-6和IL-17表达含量（P<0.01），升高哮喘保护细胞因子IL-10含量（P<0.01），降低肺组织中TGF-β₁，α-SMA mRNA水平（P<0.01），进一步增加自噬小体数量，显著增强肺组织DC中ATG5水平及下调SQSTM1水平（P<0.05，P<0.01），并可下调肺组织中STAT3及p-STAT3水平（P<0.01）。结论 五虎汤可能通过抑制STAT3蛋白，上调肺组织DC自噬水平，从而有效改善RSV诱发哮喘小鼠气道炎症、气道重塑，降低气道高反应性。

Wuhutang Alleviates Respiratory Syncytial Virus-induced Asthma in Mice by Inhibiting STAT3 Protein and Regulating Dendritic Cell Autophagy