ROS/JNK/FoxO3a信号通路在钩吻素子抑制结肠癌细胞增殖和诱导凋亡中的作用

目的 以人结肠癌细胞HCT-116细胞为研究对象，通过在培养液中加入不同浓度的钩吻素子（Kou，0，100，200，400 μmol·L^-1），进一步探讨Kou对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子作用机制。方法 Kou体外干预HCT-116细胞24 h后，用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测其对细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡及活性氧（ROS）的表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测叉头蛋白O3a（FoxO3a）mRNA表达情况，采用小干扰核糖核酸（siRNA）进行细胞转染，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测FoxO3a靶基因蛋白的表达情况。结果 与空白组比较，Kou处理明显降低了HCT-116细胞的增殖率（P<0.05，P<0.01），呈剂量依赖性。与空白组比较，Kou处理引起细胞周期阻滞于G₀/G₁期并诱导HCT-116细胞的凋亡（P<0.05，P<0.01），其作用与Kou的浓度呈正相关；FoxO3a siRNA干扰显著降低了FoxO3a及其下游相关细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（p21），细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B（p27）和细胞死亡调解子（Bim）蛋白的表达（P<0.01）。与空白组比较，Kou处理诱导了HCT116细胞中氨基末端激酶（JNK）的活化（P<0.01），JNK特异性抑制剂（SP600125）处理抑制了Kou诱导的FoxO3a活化及其下游相关蛋白的表达（P<0.01）；乙酰半胱氨酸（NAC）处理显著降低了Kou诱导的ROS水平和JNK信号的活化（P<0.01）。结论 Kou能有效抑制结肠癌细胞HCT-116的增殖，促进HCT-116细胞的凋亡，其机制可能与其作用于ROS/JNK/FoxO3a途径有关。

Effect of Koumine on Proliferation and Apoptosis of Colorectal Cancer Cells via ROS/JNK/FoxO3a Signaling Pathway