甘草查尔酮A对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 观察甘草查尔酮A对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响，并探讨其可能作用机制。方法 细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度甘草查尔酮A对MDA-MB-231细胞存活率的影响；甘草查尔酮A（10，20，40 μmol·L^-1）作用MDA-MB-231细胞24 h，分别用细胞凋亡试剂盒（Annexin V-FITC/PI）检测细胞凋亡情况；荧光探针法（DCFA-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平，荧光探针（JC-1）法检测细胞线粒体膜电位（MMP）；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）的表达及内质网应激相关蛋白（CHOP），转录激活因子4（ATF4），蛋白激酶R样内质网激酶（PERK），磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK），真核翻译起始因子2α（eIF2α），磷酸化真核翻译起始因子2α（p-eIF2α）表达。结果 与空白组比较，随着甘草查尔酮A浓度增大，从甘草查尔酮A 5 μmol·L^-1开始，细胞存活率明显降低（P<0.05），其半数抑制浓度（IC₅₀）为19.05 μmol·L^-1；甘草查尔酮A（10，20，40 μmol·L^-1）组细胞凋亡明显升高（P<0.05），甘草查尔酮A 40 μmol·L^-1时细胞凋亡率达30.2%（P<0.05）；甘草查尔酮A（10，20，40 μmol·L^-1）使抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显降低（P<0.05），促凋亡蛋白Bax表达明显升高（P<0.05），且呈浓度依赖性；甘草查尔酮A（10，20，40 μmol·L^-1）明显升高细胞内ROS水平（P<0.05），降低线粒体MMP水平（P<0.05），导致线粒体功能障碍，呈浓度依赖性；甘草查尔酮A（10，20，40 μmol·L^-1）诱导内质网应激，使内质网应激相关蛋白CHOP，ATF4表达明显增多，磷酸化（p）-PERK，p-eIF2α表达明显升高（P<0.05），呈浓度依赖性。结论 甘草查尔酮A可能通过增加细胞内ROS水平，降低MMP引起线粒体功能障碍和内质网应激诱导MDA-MB-231细胞凋亡。

Effect of Licochalcone A on Apoptosis in Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells