健脾补肺方对幼龄哮喘大鼠cAMP/PKA/CREB信号通路的影响

目的 观察健脾补肺方对卵蛋白（OVA）致敏并攻击复制的幼龄哮喘大鼠模型气道炎症、高反应性及环磷酸腺苷（cAMP）信号通路活性的影响。方法 雄性SD大鼠75只，随机选取15只作为正常组，剩余大鼠随机分为哮喘模型组，健脾补肺方组（8.37 g·kg^-1·d^-1），氨茶碱组（40 mg·kg^-1·d^-1）和地塞米松组（0.1 mg·kg^-1·d^-1），每组15只。用0.2% OVA的氢氧化铝凝胶10点致敏，并以1% OVA生理盐水溶液雾化攻击复制幼龄大鼠哮喘模型，并给予相应的药物处理。小动物肺功能仪观察大鼠气道高反应（AHR）变化，支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数及分类计数观察炎症细胞数量变化，苏木素-伊红（HE），马松（Masson）和碘酸雪夫氏（PAS）染色观察肺组织病理学变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中白细胞介素（IL）-4，IL-5，IL-13，γ干扰素（IFN-γ），肿瘤坏死因子（TNF）-α和血浆中cAMP水平变化；免疫组化法观察肺组织蛋白激A（PKA）蛋白表达变化，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）观察肺组织环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB） mRNA和蛋白表达变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠气道阻力（RL）明显增加而Cdyn明显降低（P<0.05），BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例显著升高，外周血IL-4，IL-5，IL-13，TNF-α水平显著升高而IFN-γ水平显著降低（P<0.01），肺组织病理改变明显；cAMP水平显著下降，肺组织中PKA和CREB的表达显著下调（P<0.01）。与模型组比较，健脾补肺方可以抑制AHR，降低BALF中的白细胞总数和嗜酸性粒细胞比例及RL（P<0.05），改善大鼠肺组织病理改变，增加Cdyn（Cdyn），上调大鼠血清中cAMP水平和肺组织中 PKA和CREB表达（P<0.01）。结论 健脾补肺方能够改善幼龄哮喘大鼠的AHR，抑制气道炎症，减轻肺组织损伤，其机制可能与上调cAMP/PKA/CREB通路活性相关。