加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠耐药相关基因及IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 通过建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型，观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠免疫功能、耐药相关基因及白细胞介素-7（IL-7）介导的Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响，阐明加味龟鹿二仙胶汤的抗癌机制，为其临床应用提供依据。方法 建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型，分为正常组（不造模），模型组（等体积生理盐水），顺铂组（顺铂，2 mg·kg^-1），中药组（加味龟鹿二仙胶汤，19.63 g·kg^-1·d^-1），联合组（加味龟鹿二仙胶汤，19.63 g·kg^-1·d^-1+顺铂，2 mg·kg^-1），每组10只，分别给药，干预21 d。观察小鼠一般情况、脏器指数，计算抑瘤率，流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞（CD4⁺ CD25⁺Treg），酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中细胞因子水平IL-7，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中耐药相关基因P-糖蛋白（P-gp），多药耐药相关蛋白1（MRP1）mRNA的表达水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果 与模型组比较，中药组及联合组摄食量增加，精神状态较好，反应灵敏，体质量增加。与顺铂组比较，联合组胸腺指数、脾脏指数显著升高（P<0.01），联合组抑瘤率明显升高（P<0.01）。与顺铂组比较，中药组、联合组CD4⁺ CD25⁺Treg /CD4⁺明显降低（P<0.05，P<0.01），中药组、联合组IL-7水平显著升高（P<0.01）。与顺铂组比较，中药组、联合组P-gp，MRP1 mRNA表达明显降低（P<0.05，P<0.01），中药组、联合组Wnt1，β-catenin蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可明显抑制Lewis肺癌小鼠体内肿瘤的生长，其作用机制可能与其能够解除机体免疫抑制状态，促进机体产生IL-7，调节IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路，减少肺癌组织中耐药相关基因的表达有关。