四神丸挥发油对慢性溃疡性结肠炎小鼠TLR/MyD88信号通路的调控作用

目的 从Toll样受体（TLR）/髓样分化因子88（MyD88）信号通路，探讨四神丸挥发油有效治疗慢性溃疡性结肠炎的可能机制。方法 将BALB/c小鼠随机分成正常组，模型组，四神丸挥发油组，二神丸挥发油组，五味子散挥发油组和美沙拉嗪组，采用葡聚糖硫酸钠（DSS）建立慢性溃疡性结肠炎小鼠模型，灌胃给药7 d后，通过体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度、结肠镜下损伤评分评价其疗效；用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测结肠组织上清液中白细胞介素-4（IL-4），白细胞介素-10（IL-10），白细胞介素-17A（IL-17A），白细胞介素-21（IL-21）和γ干扰素（IFN-γ）水平，同时用蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测各组小鼠结肠黏膜中TLR/MyD88信号通路相关蛋白，包括TLR2，MyD88，Ras相关的C3肉毒素底物1（Rac1），白细胞介素-1受体相关激酶4（IRAK4），白细胞介素-1受体相关激酶1（IRAK1），肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6），转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1（TAB1），转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白2（TAB2），丝裂原活化蛋白激酶激酶6（MKK6），p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）和环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）的表达水平。结果 与正常组比较，模型组结肠长度显著降低，结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著升高，IL-10水平显著降低，IL-4，IL-21和IFN-γ水平明显升高（P<0.05，P<0.01），TLR2，MyD88，Rac1，IRAK4，IRAK1，TRAF6，TAB1，TAB2，MKK6，p38 MAPK和CREB蛋白表达量均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，经四神丸挥发油干预后，小鼠结肠长度显著增加，结肠质量、结肠质量指数和结肠镜下病理损伤评分均显著降低，且小鼠结肠组织中IL-10水平明显升高，而IL-4，IL-17A，IL-21和IFN-γ水平明显降低（P<0.05，P<0.01），同时小鼠结肠组中TLR2，MyD88，Rac1，IRAK4，IRAK1，TRAF6，TAB1，TAB2，MKK6，p38 MAPK和CREB蛋白表达量均明显下调（P<0.05，P<0.01）。结论 四神丸挥发油能有效改善慢性溃疡性结肠炎的炎性损伤，可能是通过抑制TLR/MyD88信号通路实现的。

Regulatory Effect of Volatile Oil from Sishenwan on TLR/MyD88 Signaling Pathway in Mice with Chronic Ulcerative Colitis