豆甾醇通过抑制钙离子内流抑制大鼠前列腺间质细胞收缩

[目的] 检测豆甾醇对前列腺间质细胞收缩的抑制作用。[方法] 体外培养大鼠原代前列腺间质细胞，通过鬼笔环肽染色法对前列腺间质细胞进行表型鉴定；用细胞增殖及乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测豆甾醇对前列腺间质细胞活力和毒性的影响；用胶原凝胶收缩实验检测对前列腺间质细胞收缩功能的影响；运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法研究豆甾醇对收缩相关的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）的mRNA水平表达的影响；用蛋白免疫印迹（WesternBlot）法检测豆甾醇对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的α-SMA表达的影响；流式细胞术检测豆甾醇对乙酰胆碱（ACh）诱导的细胞内钙离子浓度的影响。[结果] 大鼠原代前列腺细胞培养获得的细胞以间质平滑肌细胞为主；浓度低于10μmol/L的豆甾醇对前列腺间质细胞的活力无明显影响，且无明显毒性；胶原凝胶实验结果显示，血清可以使前列腺间质细胞收缩，差异具有统计学意义（P<0.01），10μmol/L的豆甾醇可显著抑制该收缩作用，抑制率可达到77.1%，差异具有统计学意义（P<0.05）；RT-PCR结果显示，豆甾醇显著降低大鼠前列腺间质细胞中α-SMA和CollagenⅠmRNA水平的表达，差异具有统计学意义（P<0.01）；WesternBlot结果显示，豆甾醇可以抑制TGF-β1诱导的α-SMA蛋白的表达；流式细胞实验发现ACh刺激导致的钙离子浓度明显增加可以被豆甾醇显著抑制。[结论] 豆甾醇可抑制前列腺间质收缩，其机制与抑制其钙离子内流有关。

Stigmasterol inhibits the contraction of rat prostatic stromal cells by inhibiting calcium influx